目的 探究万古霉素对脂多糖(LPS)刺激肺癌细胞炎症反应、NOD样受体蛋白(NLRP)3/半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1信号的影响。方法 收集人肺癌A549细胞常规培养后将其分为对照组(经LPS诱导的A549细胞)、10、20、40μg/ml组(万古霉素10μg/ml+经LPS诱导的A549细胞)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6水平，采用Hoechst33342染色检测细胞凋亡形态，采用Transwell试验检测细胞侵袭；采用划痕试验检测细胞迁移；Western检测细胞中NLRP3、Caspase-1蛋白表达。结果 与对照组比较，10、20、40μg/ml组IL-1β、TNF-α、IL-6、细胞侵袭数量、NLRP3、Caspase-1蛋白、划痕愈合率明显降低，呈剂量依赖性(P<0.05);细胞凋亡形态显示，对照组可见明显细胞核固缩、团块现象；与对照组相比，10、20、40μg/ml组核固缩细胞数升高，其中40μg/ml组核固缩细胞数升高显著。结论 万古霉素对降低LPS诱导肺癌细胞引发的炎症反应和调节NLRP3/Caspase-1信号通路具有一定积极效用。
目的 评价加味补肺汤治疗老年痰瘀阻肺型慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重(AECOPD)的临床疗效并阐释其作用机制。方法 将72例AECOPD老年患者随机分为对照组和治疗组，各36例。对照组按照COPD全球倡仪(GOLD)指南采用常规标准方案进行治疗，治疗组在标准方案的基础上给予加味补肺汤口服，疗程为10 d。观察两组治疗前后的中医证候量表评分、炎症指标、6 min步行距离、COPD评估测试(CAT)评分、血气分析、肺功能及不良反应发生率。所有患者治疗前后进行血清Gasdermin(GSDE)M、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3水平检测及其中每组各12例患者进行肺泡灌洗液caspase-3表达积分及细胞凋亡指数检测，比较两组之间及治疗前后差异。培养人支气管上皮细胞并构建AECOPD模型，使用加味补肺汤进行干预，观察caspase-3、GSDME mRNA及蛋白表达水平。结果 治疗组和对照组在治疗前一般情况及临床指标无统计学差异(P>0.05)。治疗后，两组上述指标较治疗前均有好转趋势，其中治疗组中医症候量表评分、6 min步行距离、CAT评分、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6改善更为明显(P<0.05);治疗后，两组肺功能较治疗前均明显下降(P<0.05),但治疗组第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1占预计值的百分比(FEV1%Pred)下降不明显(P>0.05)。两组不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。两组治疗后血清中caspase-3水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中caspase-3表达积分及细胞凋亡指数较治疗前均显著降低，治疗组较对照组显著更低(P<0.05)。人支气管上皮细胞AECOPD模型中，治疗后，两组细胞中caspase-3、GSDME mRNA及蛋白水平较治疗前明显降低，且治疗组显著更低(P<0.05)。结论 加味补肺汤对痰瘀阻肺型AECOPD老年患者具有降低机体炎症状态，改善中医证候量表评分、氧合指数、6 min步行距离，减缓肺功能下降的作用，其机制可能与调节Caspase-3/GSDME途径介导的细胞焦亡有关。
<正>心肌缺血是由于冠状动脉发生粥样硬化，导致血管狭窄或闭塞，进而导致心肌缺血、缺氧，最终可能导致心肌组织不可逆性坏死，即心肌梗死(MI)。如今，溶栓治疗、经皮冠状动脉介入手术及冠状动脉旁路移植术已被广泛应用，但是MI的标准治疗并不能够修复缺血性损伤后受损的细胞，导致体力活动受限、药物终生使用和心力衰竭复发风险较高[1,2]。所以人们一直在寻找替代疗法，间充质干细胞(MSCs)由于易分离和扩增而受到广泛关注[3]。
目的 探讨隐丹参酮(CPT)调节Ras同源基因家族成员(Rho)A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路对椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡的影响。方法 构建椎间盘退变大鼠模型，将造模后的大鼠随机分为模型组、CPT高、中、低剂量(45、15、5 mg/kg CPT)组及CPT高剂量(45 mg/kg CPT)+Rho激活剂(LPA,50μmol/L LPA)组，并以仅在皮肤做切口的大鼠为假手术组，磁共振成像检测大鼠椎间盘退变；甲苯胺蓝、原位末端标记法(TUNEL)染色分别检测髓核组织形态及细胞凋亡变化；酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测髓核组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-1β水平及凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胶原蛋白(HCB)Ⅱ表达；Western印迹检测髓核组织中RhoA、ROCK蛋白表达。结果 模型组较假手术组髓核细胞呈长梭形，有明显炎性浸润，Bcl-2、HCBⅡmRNA表达显著降低，Pfirrmann分级评分、细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β水平、Bax mRNA、RhoA、ROCK蛋白表达显著增加(P<0.05);CPT高、中、低剂量组较模型组炎性浸润逐渐减少，细胞数量有所增加，Bcl-2、HCBⅡmRNA表达显著增加，Pfirrmann分级评分、细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β水平、Bax mRNA、RhoA、ROCK蛋白表达显著降低，不同CPT存在组间显著差异(P<0.05);CPT高剂量+LPA组较CPT高剂量组炎性浸润有所增加，细胞数量有所减少，Bcl-2、HCBⅡmRNA表达显著降低，Pfirrmann分级评分、细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β水平、Bax mRNA、RhoA、ROCK蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论 CPT通过调节RhoA/ROCK信号通路改善椎间盘退变大鼠髓核细胞凋亡。
目的 探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血乳酸、红细胞分布宽度(RDW)对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重合并呼吸衰竭(RF)的预测价值。方法 将134例老年COPD急性加重合并RF患者按治疗预后不同分为预后良好组(95例)与预后不良组(39例)。对比两组一般资料及NLR、血乳酸、RDW等实验室指标差异，采用Logistic回归分析确定患者预后的危险因素；采用受试者工作特征(ROC)曲线分析NLR、血乳酸和RDW预测患者预后的价值。结果 与预后良好组比，预后不良组急性生理与慢性健康评估(APACHE)Ⅱ评分、NLR、C反应蛋白(CRP)、血乳酸和RDW水平均显著增高(P<0.05)。Logistic回归模型筛选预后的危险因素结果显示，NLR、血乳酸和RDW均为患者预后的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示，在预测老年COPD合并RF患者预后方面，NLR、血乳酸和RDW的曲线下面积(AUC)分别为0.796、0.758、0.743,三者联合的AUC为0.903。结论 NLR、血乳酸和RDW均为老年COPD急性加重合并RF患者预后的危险因素，三者对预后不良的发生有预测价值，且联合应用的预测效能更好。
目的 旨在利用网络药理学和生物信息学方法，阐明人参精准抗T细胞衰老的潜在作用机制。方法 通过将T细胞与D氨基半乳糖胺共培养48 h诱导T细胞衰老，并对衰老前后的T细胞进行转录组测序。利用R语言中DEseq2包，识别衰老T细胞的差异表达基因。利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药整合药理学研究平台(TCMIP)、草药成分和靶标数据库(HIT2)、Pub Chem及Swiss Target Prediction数据库获取人参的活性分子及其药物靶点。利用R语言中ClusterProfiler包进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析进一步阐明靶基因的潜在功能，利用STRING数据库和Cytoscape软件构建靶基因的蛋白-蛋白互作(PPI)网络，并筛选核心基因。最后，通过分子对接技术验证人参活性分子对上述药物靶点的作用效能。结果 共确定了人参抗T细胞衰老的75个靶基因，进一步筛选得到8个核心基因。KEGG通路富集分析发现人参抗T细胞衰老机制主要参与p53信号通路、脂质和动脉粥样硬化、细胞衰老等通路。此外，分子对接结果表明过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、血红素加氧酶(HMOX)1和B细胞淋巴瘤(Bcl)-2样蛋白(BCL2L)1基因编码蛋白与人参活性分子之间具有稳定的结合能力。结论 网络药理学证明人参通过多靶点、多通路发挥精准抗T细胞衰老作用，并在T细胞衰老相关疾病治疗中具有重大的临床意义和应用前景。
目的 探讨老年恶性肿瘤(MT)患者发生静脉血栓栓塞症(VTE)的危险因素，并构建、验证风险评估模型。方法 选取250例老年MT患者，按4∶1的比例随机分为训练集(n=200)、验证集(n=50),评估并记录患者VTE发生情况，分为发生组、未发生组；采集患者临床资料，基于建模组数据，经Logistic回归分析老年MT患者发生VTE的风险因素；利用R软件构建列线图风险评估模型，并经受试者工作特征(ROC)曲线进行验证，评估模型的预测效能。结果 训练集200例患者中，20例(10%)发生VTE。经单因素、Logistic回归分析结果显示，临床分期为Ⅲ～Ⅳ期、衰弱评分>2分、D-二聚体及中性粒细胞与淋巴细胞计数比值(NLR)升高均为老年MT患者发生VTE的影响因素，血清白蛋白是其保护因素(P<0.05)。老年MT患者VTE的风险评估模型经Bootstrap法检验，绘制校准曲线，结果显示，列线图模型区分度好，校准曲线Y与X直线相近；经ROC曲线验证，列线图预测模型老年MT患者发生VTE的曲线下面积(AUC)>0.71,有较高的预测价值。结论 老年MT患者VTE的发生受多种因素影响，其中肿瘤临床分期、患者衰弱状态、D-二聚体水平、血清白蛋白水平及NLR是影响VTE发生的关键独立危险因素。基于上述5项关键因素构建的列线图预测模型，经验证具有较高的预测效能与区分度，可预测老年MT患者发生VT的风险。
目的 分析车叶草苷酸(ASPA)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS-STING)-干扰素(IFN)基因刺激因子(STING)信号通路对胰腺癌(PC)细胞免疫逃逸的影响。方法 用细胞计数(CCK)-8法分析不同浓度ASPA处理sw1990细胞增殖情况和半抑制浓度(IC50)。将细胞分为标准组、ASPA低、中、高剂量组(L-、M-、H-ASPA组)及RU.521组(cGAS抑制剂RU.521)。观察细胞克隆、增殖及凋亡，并检测自然杀伤(NK)细胞迁移数及杀伤活性。用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析共培养液中IFN-γ、粒酶(Granzyme)B表达，Western印迹法检测cGAS、STING、TANK结合激酶(NAK/TBK)1、IFN调节因子(IRF)3、程序性死亡配体(PD)-L1蛋白表达。结果 与标准组比较，L-、M-及H-ASPA组细胞凋亡率、cGAS、STING、NAK/TBK1、IRF3蛋白、NK细胞杀伤活性、IFN-γ、GranzymeB表达明显增加，存活率、克隆细胞数、细胞迁移数、PD-L1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与H-ASPA组比较，RU.521组存活率、克隆细胞数、细胞迁移数、PD-L1蛋白表达明显增加，细胞凋亡率、cGAS、STING、NAK/TBK1、IRF3蛋白、NK细胞杀伤活性、IFN-γ、GranzymeB表达明显降低(P<0.05)。结论 ASPA可能参与激活cGAS-STING信号通路，抑制PC细胞免疫逃逸。
<正>老年患者常合并多种基础疾病，心肺等重要器官功能储备显著下降，使得围术期管理面临巨大挑战。加之全身麻醉本身即可通过多种机制诱发肺不张，包括功能残气量(FRC)下降、膈肌功能抑制、呼吸道分泌物滞留及吸收性肺不张等。据报道，高达90%的患者在麻醉诱导后数分钟内即可出现影像学可见的肺不张，而老年患者由于胸廓顺应性降低、肺弹性回缩力减弱及闭合气量(CV)增加等生理性老化改变，更易形成顽固且广泛的肺不张[1]。
目的 探究松果菊苷(ECH)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞炎性损伤的影响。方法 噻唑蓝(MTT)法检测ECH和cGAS-STING信号通路激活剂(RocA)对人肺泡上皮细胞A549的毒性；将A549分为Control组(常规培养)、LPS组(30 mg/L)、ECH低、中、高剂量(ECH-L、ECH-M、ECH-H)组、RocA组。5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Edu)染色、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症相关因子水平[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6];实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中cGAS、STING mRNA表达；Western印迹检测增殖、凋亡相关蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2]及cGAS-STING通路蛋白表达。结果 相较于Control组，LPS组A549细胞EdU阳性率、PCNA、Bcl-2表达明显降低，凋亡率、TNF-α、IL-6水平、cGAS、STING mRNA及Bax、cGAS、STING、TBK1、IRF3蛋白表达明显升高(P<0.05);相较于LPS组，ECH-L、ECH-M、ECH-H组A549细胞Edu阳性率、PCNA、Bcl-2表达依次明显升高，凋亡率、TNF-α、IL-6水平、cGAS、STING mRNA及Bax、cGAS、STING、TBK1、IRF3蛋白表达依次明显降低，呈剂量依赖性(P<0.05);RocA可拮抗ECH在LPS诱导A549细胞炎性损伤过程中的保护效果(P<0.05)。结论 ECH可增强LPS诱导的肺泡上皮细胞活性，抑制细胞凋亡和炎症反应，其机制可能与阻滞cGAS-STING通路相关。