目的 探讨蒙药额尔敦-乌日勒(EU)对老年大鼠激素性股骨头坏死(SANFH)细胞自噬与凋亡的影响。方法大鼠随机分成正常组、模型(SANFH)组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(MA)组、EU组和3-MA+EU组。除正常组外,其余4组均采用脂多糖(LPS)联合臀肌注射甲泼尼松龙(MPS)建立激素诱导的股骨头坏死模型。在此基础上,3-MA组与3-MA+EU组同时接受3-MA处理;EU组与3-MA+EU组采用灌胃方式每日给予0.1 g/kg EU,持续6 w。采用苏木素-伊红(HE)染色观察组织病理形态,原位末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡,免疫组化法检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自噬相关蛋白(Beclin)-1、p62表达,运用Western印迹进一步验证Bax、Bcl-2、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链(LC)3蛋白表达。结果 模型组股骨头软骨细胞相较于正常组出现明显的簇状肥大特征,排列紊乱无序,骨小梁结构松散,并伴有形态不规则现象。相较于正常组,模型组Bax与p62表达明显升高,Bcl-2、Beclin-1及LC3表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,EU组Bax和p62表达显著降低,Bcl-2和Beclin1表达显著升高(P<0.05);3-MA组Bax和p62表达较模型组明显升高,Bcl-2和Beclin1表达明显降低(P<0.05);与EU组相比,EU+3MA组Bax和p62表达明显升高,Bcl-2和Beclin1表达明显降低(P<0.05)。结论 EU能够通过促进细胞自噬作用,发挥抗凋亡效果,抗老年大鼠激素性股骨头坏死。
<正>全髋关节置换术/全膝关节置换术(THA/TKA)是治疗终末期骨关节炎等疾病的成熟术式,尤其在老年患者中,可以显著缓解疼痛、改善关节功能,并提高生活质量[1]。随着人口老龄化和关节炎患病率上升,全球THA/TKA需求持续增长,据预测,到2030年,仅美国每年将实施超过300万例TKA[1],老年患者占相当比例。这一趋势使术后康复的重要性愈发凸显:手术成功解除关节病理改变后,如何通过系统的康复干预使患者最大程度恢复独立行走和生活自理能力,成为骨科与康复领域共同关注的问题。老年患者术后功能恢复存在特殊挑战,一方面,衰弱与共病常限制老年人的康复潜力。肌肉萎缩、骨质疏松(OP)、心肺储备下降等因素可能延缓术后运动功能重建[2,3]。老年人术后常见的并发症(贫血、疼痛、谵妄等)也会影响康复进程[4]。另一方面,老年患者对术后功能恢复的需求更为迫切。
目的 基于静息态脑电数据探讨美金刚联合多奈哌齐治疗老年阿尔茨海默病(AD)合并认知功能障碍(CI)患者的临床疗效及其对大脑功能的改善作用。方法 前瞻性选取老年AD合并CI患者190例,使用随机数字表法抽选95例为对照组,另外95例为试验组。对照组采用多奈哌齐治疗配合常规认知功能训练,试验组在对照组基础上联合美金刚片治疗,两组均连续治疗8 w。分别于治疗前及治疗后8 w采集两组8通道静息态脑电数据(Fp1、Fp2、C3、C4、F7、F8、O1、O2),通过快速傅里叶变换计算并比较治疗前后θ波、α波绝对功率。同时比较两组临床疗效、简易智能状态评估(MMSE)量表、蒙特利尔认知功能(MoCA)量表、Barthel指数、36项健康调查问卷(SF-36)得分。结果 两组治疗后Fp1、Fp2、C3、C4、F7、F8、O1、O2导联的θ频带绝对功率值均降低,α频带绝对功率值均增加,且试验组脑功能改善程度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组临床疗效良好,MMSE、MoCA评分均增加,且试验组整体疗效优于对照组,差异显著(P<0.05)。两组治疗后活动能力及生活质量均改善,Barthel指数、SF-36评分均增加,且试验组改善情况优于对照组,差异显著(P<0.05)。结论 使用美金刚联合多奈哌齐能有效治疗AD合并CI患者,调控θ波、α波绝对功率以增强患者大脑功能,同时增强认知及生活活动能力。
目的 探讨血液灌流器HA380联合连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)治疗老年脓毒症急性肾损伤预后的影响因素。方法 回顾性分析接受HA380联合CVVH治疗的230例老年脓毒症急性肾损伤患者的临床资料,根据患者治疗后28 d预后分为生存组和死亡组。统计两组临床资料,多因素Logistic回归分析老年脓毒症急性肾损伤患者应用HA380联合CVVH治疗后预后的影响因素。结果 HA380联合CVVH治疗后,230例中死亡72例(31.30%)。死亡组血乳酸、C反应蛋白(CRP)、胱抑素(Cys)C、降钙素原(PCT)水平、急性生理与慢性健康状况评估(APACHE)Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分明显高于生存组,血管内皮生长因子(VEGF)水平明显低于生存组(P<0.05);血乳酸、CysC、CRP、PCT、APACHEⅡ、SOFA评分为老年脓毒症急性肾损伤患者治疗后死亡的危险因素,VEGF为保护因素(P<0.05)。结论 血乳酸、CysC、CRP、PCT、VEGF、APACHEⅡ、SOFA评分是老年脓毒症急性肾损伤患者预后的影响因素,临床上应密切关注以上指标以改善患者预后。
目的 探讨硒结合蛋白(SELENBP)1在结直肠癌中的意义及其对铁死亡的作用机制。方法 将SW620细胞分为对照组、SELENBP1(+)组和si-SELENBP1组,分别给予阴性对照处理、SELENBP1过表达慢病毒感染及SELENBP1 si RNA转染。采用细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞增殖活性,流式细胞术分析凋亡水平,划痕实验评价迁移能力,Western印迹检测SELENBP1及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)4蛋白表达,同时测定细胞内铁离子和活性氧(ROS)水平。结果 SELENBP1表达与SW620细胞增殖率呈显著负相关(r=-0.541,P<0.001),与凋亡率、细胞内铁离子、ROS水平均呈显著正相关(r=0.875、0.332、0.416,均P<0.001)。与对照组相比,SELENBP1(+)组SELENBP1和GPX4蛋白表达、细胞内铁离子及ROS水平均显著升高,细胞增殖活性和12 h迁移率显著降低,凋亡率显著升高(均P<0.05),24 h迁移率差异无统计学意义(P>0.05);si-SELENBP1组SELENBP1和GPX4蛋白表达、铁离子及ROS水平均显著降低,细胞增殖活性和12 h迁移率显著升高,凋亡率显著降低(均P<0.05),24 h迁移率与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结论 SELENBP1高表达可减弱SW620细胞增殖及早期迁移能力,并增强细胞凋亡,其作用可能与铁代谢及氧化应激相关指标的改变有关。
<正>肩袖损伤是老年人群中常见的肩部疾病,表现为肩部疼痛、活动受限及肌力减弱,严重影响生活质量。随着全球人口老龄化趋势加剧,老年人肩袖损伤的发病率持续上升,防治需求日益突出[1]。老年人由于肌腱组织发生退行性改变及血供不足,肩袖损伤的发生机制复杂,且修复能力较年轻人明显下降[2]。老年患者常伴有骨质疏松(OP)、慢性疾病等多种合并疾病,均对肩袖损伤的治疗效果和康复进程产生重要影响[3]。运动疗法作为肩袖损伤的保守治疗手段,因其安全性高、并发症少,成为老年患者首选的治疗方式。研究表明,合理运动干预不仅有助于缓解疼痛,改善肩关节功能,还能促进肌腱组织修复和再生[4]。因此,如何科学确定介入时机和优化运动量,成为提升康复效果、减少再损伤风险的关键问题。
目的 探讨松果菊苷(ECH)通过环状RNA(Circ)SV2b/微小RNA(miR)-5107-5p/叉头框蛋白(Fox)k1轴抑制氧化应激缓解帕金森病(PD)的作用机制。方法 腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立小鼠PD模型,将C57小鼠随机分为正常(NC)组、模型(MPTP)组和ECH(灌胃30 mg/kg ECH)组各10只。将PC12细胞随机分为空白对照(Control)组、6-OHDA(PD细胞模型)组、6-OHDA+NC组(转染NC)、6-OHDA+OE-CircSV2b组(转染OE-CircSV2b)。检测小鼠行为学指标;检测单胺类神经递质及代谢产物水平;免疫荧光检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)表达;荧光原位杂交检测Foxk1、miR-5107-5p和CircSV2b水平;双荧光素酶报告基因法验证miR-5107-5p与CircSV2b、Foxk1之间的靶向关系;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达;RNA下拉(pull-down)实验检测CircSV2b与miR-5107-5p之间的调控机制;噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡率;生化法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平。结果 与NC组相比,MPTP组活动总距离、步幅明显缩短,通过跑道总时间、步行周期、支撑相时间、脚间距、爬杆总时间、头转向下时间明显增加,多巴胺(DA)、二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(HT)、Bcl-2 mRNA、TH阳性表达、CircSV2b、Foxk1表达显著降低,Bax mRNA、miR-5107-5p表达显著升高(P<0.05);与MPTP组相比,ECH组中上述指标均明显相反(P<0.05)。miR-5107-5p与CircSV2b和Foxk1之间存在结合位点,且miR-5107-5p为CircSV2b的靶标,Foxk1为miR-5107-5p的靶标。与Control组相比,6-OHDA组细胞中CircSV2b、Foxk1表达、细胞48 h存活率、SOD活性显著降低,miR-5107-5p表达、细胞凋亡率、MDA、ROS水平显著升高(P<0.05);与6-OHDA+NC组相比,6-OHDA+OE-CircSV2b组中上述指标均明显相反(P<0.05)。结论 ECH能够有效改善PD小鼠行为学障碍,调节脑组织神经递质水平,减少神经元的凋亡,其作用机制可能与调控CircSV2b/miR-5107-5p/Foxk1轴抑制氧化应激损伤有关。
目的 检测三叶因子(TFF)3与信号转导和转录激活因子(STAT)3在胃癌组织及癌旁组织中的表达,分析二者表达差异在胃癌变过程中的作用及临床意义。方法 收集63例胃癌组织及同期30例癌旁组织,采用免疫组织化学方法检测TFF3和STAT3在二者中表达,比较表达差异并分析胃癌组织中TFF3与STAT3的相关性和两个指标与胃癌患者临床病理参数的关系。结果 胃癌组织中TFF3和STAT3表达明显高于癌旁组织(P<0.001)。TFF3表达在不同临床分期、是否具有淋巴结转移胃癌患者中差异显著(P<0.05)。STAT3表达在不同肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移及不同TNM分期胃癌患者中差异均显著(P<0.05)。胃癌组织中TFF3表达与STAT3表达呈正相关(r=0.361,P<0.05)。结论 TFF3和STAT3在胃癌组织中高表达,并且随着胃癌恶性程度的增加其表达量而增多,两者均有促进胃癌发生发展的作用。
目的 基于肿瘤坏死因子(TNF)-α信号通路探讨5R-5-羟基雷公藤内酯醇(LLDT)-8对老年类风湿关节炎(RA)大鼠免疫功能、成纤维样滑膜细胞增殖及炎症因子的作用机制。方法 选取50只SPF级SD老年雄性大鼠,随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、LLDT-8(LT)组、TNF-α抑制剂(TI)组、LLDT-8+TNF-α抑制剂(LI)组各10只,MO组、LT组、TI组、LI组采用Ⅱ型胶原+完全弗氏佐剂注射法进行RA建模,NO组不建立该模型,建模成功后,LT组灌胃0.5 mg/kg LLDT-8,TI组灌胃2 mg/kg TNF-α抑制剂阿达木,LI组给予LLDT-8联合阿达木治疗,NO组、MO组同期灌胃同体积生理盐水,苏木素-伊红(HE)染色法检测滑膜组织病理形态,流式细胞仪检测免疫功能相关指标,噻唑蓝(MTT)法检测成纤维样滑膜细胞增殖,酶联免疫吸附试验检测血清炎症因子,Western印迹法检测TNF-α信号通路蛋白表达。结果 与MO组比较,LT组、TI组、LI组病理结构明显改善。与NO组比较,MO组血清CD4~+Treg、CD4+/CD25~+Treg表达降低,FLS细胞增殖率、血清IL-4、IL-7、IL-1β水平、滑膜组织TNF-α、TNFR1、NF-κB蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与MO组比较,LT组、TI组、LI组血清CD4~+Treg、CD4+/CD25~+Treg表达升高,FLS细胞增殖率、血清IL-4、IL-7、IL-1β水平、滑膜组织TNF-α、TNFR1、NF-κB蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),且TI组、LT组以上指标无明显差异(P>0.05),LI组较TI组以上指标变化明显(P<0.05)。结论 LLDT-8对老年RA大鼠具有显著疗效,可有效改善免疫功能,可降低成纤维样滑膜细胞增殖及炎症因子表达,这可能与抑制TNF-α信号通路有关。
目的 探讨车叶草苷(ASP)调节环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的肠上皮细胞炎性损伤的影响。方法 将人肠上皮细胞(NCM-460)随机分为Control组、Model组、低、中、高浓度ASP(L-、M-、H-ASP)组(25.0、50.0、100.0μg/ml ASP)、cGAS-STING信号通路激活剂(DDC)组(100.0μg/ml ASP+10.0μmol/L 4F-DDC)。除对照组正常培养,其余各组以LPS建立细胞损伤模型。噻唑蓝(MTT)和克隆形成实验检测各组细胞增殖;白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测;各组细胞凋亡率采用流式细胞术检测;各组增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]及cGAS-STING信号通路相关蛋白[cGAS、磷酸化(p)-STING]蛋白表达采用Western印迹检测。结果 与Control组相比,Model组NCM-460细胞存活率、克隆数、IL-10、PCNA、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax、cGAS、p-STING蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与Model组相比,L-、M-、H-ASP组细胞存活率、克隆数、IL-10、PCNA、Bcl-2蛋白显著提升,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax、cGAS、p-STING蛋白表达显著下降,且呈明显浓度依赖性(P<0.05);相比于H-ASP组,DDC组细胞存活率、克隆数、IL-10、PCNA、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、Bax、cGAS、p-STING蛋白升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ASP可能经由抑制cGAS-STING通路,降低炎症因子释放,阻滞细胞凋亡并增强增殖,进而减缓LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤。