| 225 | 0 | 57 |
| 下载次数 | 被引频次 | 阅读次数 |
目的 探讨血必净通过激活核因子E2相关因子(Nrf)2/血红素加氧酶(HO)-1通路抑制核因子(NF)-κB-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3信号轴减轻急性肺损伤。方法 成年雄性BALB/c小鼠50只分为模型组[脂多糖(LPS)诱导剂量为5 mg/kg],血必净低、高浓度组(每天分别给予10、20 mg/kg血必净1次),地塞米松组(每天给予地塞米松10 mg/kg 1次，持续3 d,最后1次给药2 h后给予LPS处理)及对照组(给予适当生理盐水，不做LPS处理)各10只。用肺上皮BEAS-2B细胞制作体外细胞模型，实验分为5组：空白组(不做处理)、模型组(给予LPS 200 ng/ml处理细胞12 h)、血必净高、低浓度组(分别给予血必净10、20 mg/ml培养12 h后，再给予LPS 200 ng/ml处理细胞12 h)、Nrf2过表达组和siNrf2组[分别转染1μl构建的Nrf2过表达载体和靶向Nrf2的siRNA(siNrf2)处理细胞12 h后，再给予LPS 200 ng/ml处理细胞12 h]。苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化，化学荧光法检测活性氧(ROS),硫代巴比受酸法(TBA)法检测丙二醛(MDA),水溶性四唑盐(WST)-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平。Western印迹检测各因子蛋白表达。免疫荧光检测Nrf2对NF-κB的影响，TUNEL染色检测细胞凋亡。结果 与对照组比较，模型组白细胞、中性粒细胞、NLRP3、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、NF-κB、ROS表达和MDA水平显著升高，Nrf2、HO-1蛋白表达和SOD水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较，血必净高、低浓度组白细胞、中性粒细胞、NLRP3、IL-1β、TNF-α、NF-κB、ROS表达和MDA水平显著降低，Nrf2、HO-1蛋白表达和SOD水平显著升高(P<0.05)。以上指标血必净高浓度组较低浓度组变化更显著(P<0.05),血必净高浓度组与地塞米松组无显著差异(P>0.05)。抑制Nrf2可明显激活NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α和胱天蛋白酶(Caspase)1蛋白表达，Nrf2过表达可明显抑制NF-κB、NLRP3、IL-1β、TNF-α、和Caspase1蛋白表达(P<0.05)。与血必净组比较，使用Nrf2抑制剂(ML385)后ROS相对表达、ROS、MDA水平及NLRP3、NF-κB蛋白表达、细胞凋亡能力显著升高，SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。而使用Nrf2激动剂萝卜硫素(Sulforaphane)后ROS相对表达、ROS、MDA水平及NLRP3、NF-κB蛋白表达、细胞凋亡能力显著升降低，SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论 血必净可能是Nrf2的有效激活剂，血必净可通过激活Nrf2/HO-1通路抑制NF-κB-NLRP3信号轴减轻急性肺损伤的氧化应急损伤和炎症表达，这可能是血必净减轻急性肺损伤炎症反应的机制。
Abstract：1 Liu H,Pan Z,Ma X,et al.ROCK inhibitor fasudil reduces the expression of inflammatory factors in LPS-induced rat pulmonary microvascular endothelial cells via ROS/NF-κB pathway[J].BMC Pharmacol Toxicol,2022;23(1):24.
2 He YQ,Zhou CC,Yu LY,et al.Natural product derived phytochemicals in managing acute lung injury by multiple mechanisms[J].Pharmacol Res,2021;163:105224.
3 吴佳妮，成群，高光霞，等.胸腺肽联合血必净治疗对AECOPD合并脓毒症患者外周血PCT、CRP、IL-6及淋巴细胞表达的影响[J].贵州医科大学学报，2022;47(4):472-6.
4 李乐辉，杨远征，林润，等.不同剂量血必净注射液联合乌司他丁注射液治疗脓毒症合并急性肺损伤的临床观察[J].中国药房，2020;31(13):1617-21.
5 Zhang Q,Liu J,Duan H,et al.Activation of Nrf2/HO-1 signaling:an important molecular mechanism of herbal medicine in the treatment of atherosclerosis via the protection of vascular endothelial cells from oxidative stress[J].J Adv Res,2021;34:43-63.
6 邱俏檬，葛赟，孙未，等.血必净注射液对硫化氢急性中毒大鼠肺组织血红素加氧酶1、醌氧化还原酶1及核转录因子红系相关因子-2的影响[C].天津：第四届世界中西医结合大会暨第十一届全国中西医结合大会论文集，2012:21.
7 孙芙林，岳涛，刘海燕，等.小豆蔻素调节Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对妊娠糖尿病大鼠氧化应激损伤的影响[J].中国优生与遗传杂志，2023;31(2):269-74.
8 顾玮，张丽，刘国权.气道滴注与腹腔注射脂多糖建立小鼠急性肺损伤模型的效果比较[J].山西医科大学学报，2020;51(11):1206-10.
9 贺慧博，郝建，杨炜.血必净对兔急性肺损伤的早期保护作用及其机制研究[J].浙江医学，2019;41(17):1821-5.
10 张朋书.脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺树突状细胞的变化及意义[D].南京：东南大学，2011.
11 Arulselvan P,Fard MT,Tan WS,et al.Role of antioxidants and natural products in inflammation[J].Oxid Med Cell Longev,2016;2016:5276130.
12 李倩.血必净对脓毒性休克患者血凝及血管内皮功能相关因子的影响[D].石家庄：河北医科大学，2018.
13 李晓卉，唐冰，朱斌，等.血必净注射液治疗全身炎症反应综合征临床疗效的Meta分析[J].中国急救医学，2013;33(1):57-61.
14 Guo Y,Liu Y,Zhao S,et al.Oxidative stress-induced FABP5 S-glutathionylation protects against acute lung injury by suppressing inflammation in macrophages[J].Nat Commun,2021;12(1):7094.
15 Yang J,Hua Z,Zheng Z,et al.Acteoside inhibits high glucose-induced oxidative stress injury in RPE cells and the outer retina through the Keap1/Nrf2/ARE pathway[J].Exp Eye Res,2023;232:109496.
16 Mapuskar KA,Pulliam CF,Zepeda-Orozco D,et al.Redox regulation of Nrf2 in cisplatin-induced kidney injury[J].Antioxidants(Basel),2023;12(9):1728.
17 Sun GY,Geng X,Teng T,et al.Dynamic role of phospholipases A2 in health and diseases in the central nervous system[J].Cells,2021;10(11):2963.
18 Rao Z,Li X,Zhang X,et al.Fengreqing oral liquid exerts anti-inflammatory effects by promoting apoptosis and inhibiting PI3K/AKT and NF-κB signaling pathways[J].Front Pharmacol,2022;13:824579.
19 Chen J,Huang Y,Bian X,et al.Berberine ameliorates inflammation in acute lung injury via NF-κB/Nlrp3 signaling pathway[J].Front Nutr,2022;9:851255.
20 Mitchell JP,Carmody RJ.NF-κB and the transcriptional control of inflammation[J].Int Rev Cell Mol Biol,2018;335:41-84.
21 Napetschnig J,Wu H.Molecular basis of NF-κB signaling[J].Annu Rev Biophys,2013;42:443-68.
22 Alehashemi S,Goldbach-Mansky R.Human autoinflammatory diseases mediated by NLRP3-,Pyrin-,NLRP1-,and NLRC4-inflammasome dysregulation updates on diagnosis,treatment,and the respective roles of IL-1 and IL-18[J].Front Immunol,2020;11:1840.
23 Kong L,Zhang H,Lu C,et al.AICAR,an AMP-activated protein kinase activator,ameliorates acute pancreatitis-associated liver injury partially through Nrf2-mediated antioxidant effects and inhibition of NLRP3 inflammasome activation[J].Front Pharmacol,2021;12:724514.
24 Wang GW,Zhang XL,Wu QH,et al.The hepatoprotective effects of sedum sarmentosum extract and its isolated major constituent through Nrf2 activation and NF-κB inhibition[J].Phytomedicine,2019;53:263-73.
25 Gao W,Guo L,Yang Y,et al.Dissecting the crosstalk between Nrf2 and NF-κB response pathways in drug-induced toxicity[J].Front Cell Dev Biol,2022;9:809952.
基本信息:
中图分类号:R285.5
引用信息:
[1]卢贞,王耀华,徐钧峰.血必净通过激活Nrf2/HO-1通路抑制NF-κB-NLRP3信号轴减轻急性肺损伤[J].中国老年学杂志,2026,46(03):518-525.
基金信息:
河北省中医药管理局课题项目(2022416)
2026-02-10
2026-02-10