- 黄明月;朱叶;谢毅强;钟军华;邱龙;尹德辉;
目的 观察缩泉益肾方对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤的影响。方法 体外培养小鼠足细胞，分为正常(N)组、高糖(HG)组、含5%、10%、20%缩泉益肾方含药血清低/中/高剂量高糖(SQYSF-L、M、H)组、含4.45μg/ml卡格列净高糖(Cana)组，CCK8法检测细胞活力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞术分析细胞凋亡，实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测各组细胞骨架相关蛋白分子结蛋白(Desmin)、α-辅动肌蛋白(actinin)-4表达。结果 体外实验结果显示，与SQYSF-L、SQYSF-H组比较，SQYSF-M组细胞存活率明显升高(P<0.01);与N组比较，HG组足细胞活力、划痕愈合率显著降低，凋亡率明显升高(P<0.01);与HG组比较，SQYSF-M组和Cana组足细胞活力、划痕愈合率显著升高，凋亡率显著下降(P<0.01);与N组比较，HG组Desmin mRNA和蛋白水平均明显增加，α-actinin-4 mRNA和蛋白水平均明显减少(P<0.01);与HG组比较，SQYSF-M组和Cana组Desmin mRNA和蛋白水平均明显减少，α-actinin-4 mRNA和蛋白水平均明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论 缩泉益肾方可增加高糖诱导的小鼠肾脏足细胞活力，提高细胞划痕愈合率，减少其凋亡，其可能通过修复细胞骨架相关蛋白分子Desmin、α-actinin-4的异常表达，稳定细胞骨架，减轻足细胞损伤。
2024年17期 v.44 4155-4159页 [查看摘要][在线阅读][下载 1535K] [下载次数：279 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 高杰;王明彪;文邦红;范雪;朱婕;胡蓉;苏敏;
目的 研究衰老对小鼠角膜中配对盒基因(Pax)6和Wnt7a表达的影响，探索其与角膜缘干细胞(LSCs)衰老的关系。方法 60只雌性昆明小鼠分为3组：青年组(2月龄),中年组(10月龄),老年组(18月龄)各20只。苏木素-伊红(HE)染色观察角膜形态结构改变，免疫荧光染色和流式细胞术检测p63、Pax6和Wnt7a分布和表达，实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测p63、Pax6和Wnt7a mRNA相对表达。结果 与青年组相比，随着月龄的增加，小鼠角膜上皮的厚度明显变薄，角膜厚度明显增厚，p63、Pax6和Wnt7a表达均逐渐明显减少(P<0.05)。结论 随着增龄，角膜呈老化趋势，可能与Pax6-Wnt7a调控有关。
2024年17期 v.44 4160-4164页 [查看摘要][在线阅读][下载 1532K] [下载次数：82 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 吴本升;周青;何宗琦;孙薛亮;杜骏;王晓鹏;
目的 探讨温阳益气方对慢传输型便秘(STC)模型小鼠跨膜蛋白(TMEM)16A及干细胞因子受体(c-kit)表达的影响。方法 采用随机数字表法将小鼠分为正常组和造模组。使用洛哌丁胺灌胃法复制小鼠便秘模型，造模成功后，随机分为模型组，温阳益气方低、中、高剂量组，普芦卡必利组。给药组给予相应的药物干预治疗1 w后，观察小鼠一般情况，检测肠道推进率、粪便含水量，评估组织学活动指数(HAI),检测小鼠结肠肌电及TMEM16A、c-kit mRNA和蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组出现大便干结伴明显减少，粪便含水量显著下降，肠道推进率降低，肠道黏膜腺体萎缩明显，结肠平滑肌电活动频率及振幅显著降低，结肠频率变异系数积及振幅变异系数显著增高，TMEM16A、c-kit mRNA及蛋白表达均显著下降(P<0.01)。与模型组相比，温阳益气方各剂量组均可增加粪便含水量、提高小鼠肠道推进率、降低HAI,提高结肠平滑肌电活动频率及振幅，降低结肠频率变异系数积及振幅变异系数，提高小鼠结肠组织内TMEM16A、c-kit mRNA及蛋白表达，差异显著，且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论 TMEM16A与c-kit表达有一定相关性，而温阳益气方改善STC的作用机制可能与提高结肠组织内TMEM16A/c-kit表达，从而调控Cajal间质细胞(ICC)有关。
2024年17期 v.44 4164-4170页 [查看摘要][在线阅读][下载 1620K] [下载次数：413 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 刘震;曾扬;李蕊;颜莹;易思程;张葵;
目的 探讨基于长链非编码(lnc)RNA H19/微小RNA(miR)-194-5p/沉默调节蛋白(SIRT)1信号轴对细胞自噬的调控作用。方法 用烟雾提取物(CSE)处理构建人气道上皮细胞慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型并干扰lncRNA H19,实验分为：空白对照(Control)组、细胞+2.5%CSE处理(CSE)组、模型+lncRNA H19干扰对照(lncRNA H19 NC)组、模型+lncRNA H19干扰(lncRNA H19-siRNA)组；利用CCK8对干扰lncRNA H19后的细胞进行细胞增殖及透射电镜自噬小体检测，通过实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹对细胞中lncRNA H19、miR-194-5p、SIRT1 mRNA和自噬相关蛋白SIRT1、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、微管相关蛋白1轻链(LC)3Ⅱ/Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin)-1、自噬相关基因(ATG)7、p62蛋白表达进行检测。结果 miR-194-5p与lncRNA H19和SIRT1存在靶向关系。后续实验选定小干扰RNA(siRNA)-2。与Control组相比，CSE组细胞自噬小体增加，lncRNA H19和SIRT1 mRNA表达升高，miR-194-5p mRNA表达下降，ATG7、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ和SIRT1蛋白表达增加，p62和p-mTOR/mTOR蛋白表达下降，差异具有统计学意义(P<0.05)。与CSE组相比，lncRNA H19干扰后的细胞自噬小体下降，miR-194-5p mRNA表达上升，lncRNA H19和SIRT1 mRNA表达下降，ATG7、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ和SIRT1蛋白表达减少，p62和p-mTOR/mTOR mRNA蛋白表达增加，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 H19表达降低，促使miR-194-5p表达上升及其靶基因SIRT1表达下降，进而单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)-mTOR信号通路减弱，调节自噬，减少上皮细胞的凋亡，从而治疗COPD。
2024年17期 v.44 4171-4176页 [查看摘要][在线阅读][下载 1251K] [下载次数：219 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 李江;邓体斌;彭家玺;周红庆;刘明生;许陈祥;
目的 探讨压力性尿失禁(SUI)与肛提肌自噬的相关性，并观察调节肛提肌自噬对漏尿症状的影响。方法 取未建模大鼠10只为对照组，30只大鼠利用扩张阴道(VD)+切除卵巢(OVX)建立SUI模型(实验组)。建模成功大鼠分别以腹腔注射自噬抑制剂甲基腺嘌呤300μg/kg(甲基腺嘌呤组)、增强剂雷帕霉素5 mg/kg(雷帕霉素组)调控自噬、腹腔注射生理盐水为对照(模型组)。再次以喷嚏实验及尿动力检查检测，后获取肛提肌组织行苏木素-伊红(HE)、Masson染色、电镜观察肛提肌形态学变化。结果 与对照组比较，模型组、甲基腺嘌呤组、雷帕霉素组LC-3Ⅱ蛋白、LC-3 mRNA、Beclin-1 mRNA及蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较，甲基腺嘌呤组和雷帕霉素组以上指标差异有统计学意义(P<0.05);与甲基腺嘌呤组比较，雷帕霉素组以上指标差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较，甲基腺嘌呤组漏尿点压明显上升(P<0.05),肛提肌纤维排列整齐，线粒体异常减少，自噬体下降。结论 SUI大鼠肛提肌中自噬水平升高，提示自噬可能与SUI的发病机制相关，降低自噬可提高漏尿点压，有效改善SUI漏尿症状。
2024年17期 v.44 4176-4180页 [查看摘要][在线阅读][下载 1724K] [下载次数：137 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 黄世杰;周佳;律广富;王雨辰;林贺;李香艳;黄晓巍;李瑞丽;
目的 探讨参红补血颗粒(SBG)对气血两虚型血管内皮功能障碍(VED)模型小鼠血管内皮和对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用及其机制。方法 将48只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组[11 ml/(kg·d)复方阿胶浆]、低剂量SBG组[3 g/(kg·d)]、中剂量SBG组[6 g/(kg·d)]和高剂量SBG组[9 g/(kg·d)],每组8只。除正常对照组外，其余各组在首次给药后第4、6、8天眼眦放血0.25 ml/10 g,第5、7、9天腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg,连续给药造模10 d。观察各组行为表现，计算各组体质量变化率，计数红细胞(RBC)和骨髓有核细胞(BMC)数并测定血红蛋白(HB)含量，苏木素-伊红(HE)染色观察各组胸主动脉病理形态表现，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清促红细胞生成素(EPO)、白细胞介素(IL)-2、IL-3和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平，试剂盒检测各组胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平。体外培养HUVECs,分为正常对照组，LPS组，低、中、高剂量SBG组；除正常对照组外，其他4组HUVECs采用LPS诱导HUVECs建立氧化损伤模型。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率，化学荧光法检测各组细胞活性氧(ROS)的相对水平，试剂盒检测各组细胞SOD活性和MDA水平及各组细胞培养液上清中一氧化氮(NO)水平，Western印迹检测各组细胞中Toll样受体(TLR)4、核因子κB抑制因子激酶(IKK)β、磷酸化核因子κB(p-p65)和IκBα蛋白表达水平。结果 与正常对照组比较，模型组体质量变化率明显降低(P<0.01),RBC、BMC计数和HB含量显著下降(P<0.01);与模型组比较，阳性对照组和高剂量SBG组体质量变化率明显升高(P<0.01),小鼠RBC、BMC计数和HB含量显著上升(P<0.05)。HE染色结果显示，与正常对照组比较，模型组胸主动脉组织出现血管结构异常，内膜部分内皮细胞损伤脱落，中膜增厚，弹力纤维排列紊乱，外膜可见少量炎症细胞浸润；与模型组比较，阳性对照组和低、中、高剂量SBG组均出现不同程度改善。与正常对照组比较，模型组血清EPO、IL-2和TNF-α水平显著上升，IL-3水平显著下降，胸主动脉组织中GSH-PX、SOD和CAT活性显著下降，MDA水平显著上升(均P<0.01),与模型组比较，阳性对照组和高剂量SBG组血清EPO、IL-2和TNF-α水平显著下降，IL-3显著上升，胸主动脉组织中的GSH-PX、SOD和CAT活性显著上升，MDA水平显著下降(P<0.01,P<0.05)。与正常对照组比较，LPS组HUVECs中NO水平显著下降，GSH-PX、SOD和CAT活性显著下降，MDA水平显著上升，细胞存活率显著下降，ROS相对水平显著升高，TLR4、IKKβ、p-p65和IκBα蛋白表达水平显著升高(均P<0.01);与LPS组比较，高剂量SBG组HUVECs中NO水平显著上升，GSH-PX、SOD和CAT活性显著上升，MDA水平显著下降，细胞存活率显著升高，ROS相对水平显著下降，HUVECs中TLR4、IKKβ、p-p65和IκBα蛋白表达水平显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论 SBG可通过改善造血能力，抑制炎症反应，降低氧化应激，进而发挥保护气血两虚型VED小鼠血管内皮的作用。
2024年17期 v.44 4181-4187页 [查看摘要][在线阅读][下载 1447K] [下载次数：363 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 姚锐;刘洁玲;王晟;邓炳取;王振华;韩朝辉;王圣坦;
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)假基因(PTENP)1通过抑制miR-106b对宫颈癌细胞化疗耐药及免疫逃逸的影响。方法 建立宫颈癌耐药细胞株CasKi/DDP细胞，将CasKi/DDP细胞分为CasKi/DDP组、pcDNA-NC组、pcDNA-PTENP1组、anti-miR-NC组、anti-miR-106b组、miR-NC mimics组和miR-106b mimics组。检测细胞中PTENP1和miR-106b表达[定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测];用MTT法、Transwell法和流式细胞仪分别检测细胞增殖、侵袭和凋亡能力；检测细胞中细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA)-4、白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达(Western印迹);双荧光素酶报告靶基因荧光检测lncRNA PTENP1和miR-106b的靶向关系。结果 与H8细胞相比，CasKi细胞和CasKi/DDP细胞中PTENP1表达显著降低，miR-106b表达显著升高(P<0.05);且CasKi/DDP细胞中PTENP1表达低于CasKi细胞，miR-106b表达高于CasKi细胞，差异显著(P<0.05);与CasKi/DDP组相比，pcDNA-PTENP1组IC50浓度、侵袭能力及CTLA-4、IL-10和TGF-β1蛋白表达显著降低，凋亡率及4、8、16、32、64、128μg/ml顺铂时细胞抑制率显著升高(P<0.05);anti-miR-106b组IC50浓度、侵袭能力和CTLA-4、IL-10和TGF-β1蛋白表达显著低于anti-miR-NC组相比，凋亡率及4、8、16、32、64、128μg/ml顺铂时细胞抑制率显著高于anti-miR-NC组(P<0.05);软件显示PTENP1的SON基因3′非编码区(3′UTR)端与miR-106b有碱基互补结合点位。靶向关系结果显示，miR-106b的荧光素酶活性显著升高(P<0.05);pcDNA-PTENP1组细胞中miR-106b表达显著低于pcDNA-NC组(P<0.05);si-PTENP1组中miR-106b较si-NC组显著升高(P<0.05)。miR-106b mimics组IC50浓度、侵袭能力和CTLA-4、IL-10和TGF-β1蛋白表达显著高于miR-NC mimics组，细胞凋亡率及4、8、16、32、64、128μg/ml顺铂时细胞抑制率显著低于miR-NC mimics组(P<0.05)。结论 过表达lncRNA PTENP1可通过下调miR-106b逆转宫颈癌细胞化疗耐药，抑制宫颈癌化疗耐药细胞增殖、侵袭和免疫逃逸，促进凋亡。
2024年17期 v.44 4187-4192页 [查看摘要][在线阅读][下载 1612K] [下载次数：118 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 唐洪波;王茜;唐洪焱;吴凯峰;黄贵川;张巍;龚玲;朱红兰;陈代刚;刘代顺;
目的 探讨姜黄素通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ抑制血小板衍生生长因子(PDGF)所致肺纤维化发生发展的可能机制。方法 40只健康雄性小鼠分为生理盐水(Ctrl)组、模型(Mod)组、罗格列酮阳性对照(Mod+Rosi)组、姜黄素早期治疗(Mod+Cur ear)组、姜黄素晚期治疗(Mod+Cur lat)组。小鼠气管内注射博莱霉素复制肺纤维化模型，给予罗格列酮、姜黄素灌胃处理14 d,第28天处死小鼠取材。支气管肺泡灌洗液(BALF)计数肺组织炎性细胞总数及分类；苏木素-伊红(HE)、Masson染色观察肺组织炎性、纤维化改变；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织PPARγ/PDGFR-β mRNA表达；免疫组化染色检测肺组织胶原蛋白(collagen)Ⅰ阳性表达率；Western检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、collagenⅠ、PPAR-γ、PDGF-B、PDGF受体(PDGFR)-β蛋白表达。结果 罗格列酮、姜黄素可抑制小鼠BALF细胞计数中炎性细胞总数及分类，降低小鼠肺组织炎症及肺纤维化改变及collagenⅠ表达，增加PPAR-γ mRNA表达，降低PDGFR-βmRNA表达，增加PPAR-γ蛋白表达及降低TGF-β、α-SMA、collagenⅠ、PDGF-B、PDGFR-β蛋白表达，差异有统计学意义(P<0.05),且在这些结果中，姜黄素早期治疗效果更明显(均P<0.05)。结论 姜黄素减轻博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维改变，其机制可能与激活PPAR-γ、抑制PDGFR-β表达有关。
2024年17期 v.44 4193-4197页 [查看摘要][在线阅读][下载 1889K] [下载次数：395 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 宋顺丰;王永彬;胡金;
目的 探讨葛根芩连汤灌肠对急性放射性直肠炎(ARP)小鼠肠道功能的保护作用及机制。方法 120只C57BL/6小鼠随机分为正常组、ARP组、西药灌肠组、低、中、高剂量葛根芩连汤灌肠组(1 800、3 600、7 200 mg/kg)。利用盆腔局部照射建立ARP小鼠模型；观察葛根芩连汤灌肠对ARP小鼠一般体征的改善作用；采用免疫组化和Western印迹法检测白细胞介素(IL)-1β、核转录因子(NF)-κB、血管内皮生长因子(VEGF)、水通道蛋白(AQP)1、AQP3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果 正常组结肠组织结构完整。与正常组相比，ARP组结肠组织损伤严重，存在大量炎性细胞浸润；IL-1β、NF-κB、VEGF、AQP1蛋白水平明显升高，AQP3蛋白水平明显降低(P<0.05)。与ARP组相比，西药灌肠组和葛根芩连汤灌肠组结肠组织损伤和炎症明显减轻；IL-1β、NF-κB、VEGF、AQP1蛋白及IOD水平明显降低，AQP3蛋白及IOD水平明显升高(P<0.05)。与正常组相比，ARP组结肠组织Bax蛋白水平明显升高，Bcl-2蛋白水平明显降低，脾脏淋巴细胞数量明显减少(P<0.05);而正常组、ARP组和葛根芩连汤灌肠组Bax和Bcl-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 葛根芩连汤通过抑制NF-κB信号通路改善ARP小鼠直肠组织炎症反应和血管生成。
2024年17期 v.44 4198-4202页 [查看摘要][在线阅读][下载 1701K] [下载次数：511 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 郭豪;王岩;王建美;刘烝昊;
目的 探讨阿芬太尼对心肌缺血再灌注(MIR)老龄大鼠心肌细胞凋亡及信号转导和转录活化因子(STAT)3/视神经萎缩(OPA)1通路的影响。方法 将老龄大鼠随机分为假手术组、模型组、阿芬太尼低、中、高剂量(5、10、20μg/kg)组和阳性对照组(美托洛尔，5μg/kg),造模结束后处死大鼠。进行2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色，并用Image Pro Plus6.0软件计算大鼠心肌梗死体积百分比，采用TUNEL法检测心肌活性氧(ROS)阳性细胞率，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平，Western印迹法检测心肌STAT3、p-STAT3、OPA1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，其余各组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达升高，SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达降低，差异显著(P<0.05)。与模型组比较，各阿芬太尼剂量组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达降低，SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达升高，且随着阿芬太尼剂量增加，各指标呈明显剂量依赖性，差异显著变化(P<0.05)。与阳性对照组比较，各阿芬太尼剂量组心肌梗死体积百分比、ROS、MDA水平、Bax和Caspase-3蛋白表达升高，SOD水平、p-STAT3/STAT3、OPA1和Bcl-2蛋白表达降低，差异显著(P<0.05)。结论 阿芬太尼通过激活STAT3/OPA1通路，抑制MIR损伤老年大鼠心肌细胞凋亡，对MIR损伤具有一定的保护作用。
2024年17期 v.44 4203-4207页 [查看摘要][在线阅读][下载 1336K] [下载次数：274 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 冷冬月;方兴刚;李旭峰;
目的 探讨益生菌通过调控Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB轴对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)功能的影响。方法 收集RA患者的滑膜组织分离得到RA-FLS细胞，并将3～8代RA-FLS分为对照组(正常培养)、肿瘤坏死因子(TNF)-α组(20 ng/ml的TNF-α)、10、50、100μg/ml益生菌组(20 ng/ml的TNF-α+10、50、100μg/ml益生菌)、pcDNA组、pcDNA-TLR4组、对照+100μg/ml益生菌组(100μg/ml益生菌)。pcDNA组、pcDNA-TLR4组细胞分别转染pcDNA和pcDNA-TLR4,然后使用100μg/ml益生菌干预细胞24 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭情况；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清白细胞介素(IL)-6、IL-1β和IL-10分泌情况；流式细胞术检测细胞凋亡情况；Western印迹检测细胞TLR4、p-P65、P65、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果 与对照组相比，TNF-α组细胞存活率、迁移和侵袭个数、细胞上清IL-6和IL-1β水平、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著升高，上清IL-10水平和细胞凋亡率显著降低(P<0.05);对照+100μl/ml益生菌组细胞存活率、细胞迁移和侵袭个数、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著降低，细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞上清IL-6、IL-1β和IL-10水平无明显差异(P>0.05);与TNF-α组相比，10、50、100μl/ml益生菌组细胞存活率、迁移和侵袭个数、细胞上清IL-6和IL-1β水平、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著降低，上清IL-10水平和细胞凋亡率显著升高(P<0.05);过表达TLR4后会减弱益生菌对RA-FLS细胞的增殖、迁移和侵袭及TLR4/NF-κB轴的抑制作用。结论 益生菌可通过抑制TLR4/NF-κB轴抑制RA-FLS细胞的增殖、迁移和侵袭功能，促进RA-FLS细胞凋亡，缓解RA炎症反应。
2024年17期 v.44 4208-4214页 [查看摘要][在线阅读][下载 1898K] [下载次数：286 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 刘宁;张洁;裴晓川;吴佳欣;马晓菲;
目的 探究香化浊调气法对功能性腹泻(FD)大鼠P物质(SP)、脑肠肽及肠黏膜损伤的影响。方法 选取健康雄性SD大鼠50只，随机分为健康组、模型组、西药(MTSS)组、中药低浓度组、中药高浓度组各10只，除健康组外其余均制备FD模型。健康组与FD组采用等量生理盐水灌胃，中药高浓度与低浓度组分别以3.6、2.4 g/ml给药，MTSS组采用蒙脱石散0.81 kg/d灌胃干预，均1次/d,连续14 d。治疗后24 h收集各组粪便称重并记录湿粪质量，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆SP,苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜损伤状况，免疫组织化学法检测结肠组织中脑肠肽的5-羟色胺(HT)、血管活性肠肽(VIP)。结果 与健康组比较，FD组粪便含水量明显升高(P<0.05);与FD组比较，MTSS组粪便含水量明显降低(P<0.05);与MTSS组比较，中药高浓度组粪便含水量明显降低(P<0.05);MTSS组与中药低浓度组比较无统计学差异(P>0.05)。与健康组比较，FD组血浆、结肠组织SP含量明显升高(P<0.05);与FD组比较，MTSS组血浆、结肠组织SP含量明显降低(P<0.05);与MTSS组比较，中药高浓度组血浆、结肠组织SP含量明显降低(P<0.05);MTSS组与中药低浓度组比较无统计学差异(P>0.05)。健康组结肠组织完整，FD组肠黏膜损伤严重，MTSS组与中药低浓度组肠黏膜组织均有好转，但仍有水肿及炎症现象；中药高浓度组肠黏膜组织恢复良好且炎性减少。与健康组比较，FD组黏膜厚度、结绒毛高度、隐窝深度明显降低(P<0.05);与FD组比较，MTSS组以上指标明显升高(P<0.05);与MTSS组比较，中药高浓度组以上指标明显升高(P<0.05);MTSS组与中药低浓度组比较无统计学差异(P>0.05)。与健康组比较，FD组结肠组织5-HT、VIP表达明显升高(P<0.05);与FD组比较，MTSS组5-HT、VIP表达明显降低(P<0.05);与MTSS组比较，中药高浓度组5-HT、VIP表达明显降低(P<0.05);MTSS组与中药低浓度组比较无统计学差异(P>0.05)。结论 香化浊调气法可治疗FD大鼠，其机制可能与降低SP、脑肠肽水平及改善肠黏膜损伤相关。
2024年17期 v.44 4214-4218页 [查看摘要][在线阅读][下载 1469K] [下载次数：248 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 韩昵薇;席微;吴涛;李宜桓;
目的 探讨长链非编码(lnc)RNA-缺氧诱导因子(HIF)-1α通过调控微小RNA(miR)-129对前列腺癌细胞增殖、侵袭的影响。方法 选取前列腺癌细胞(DU145、LNCaP、C4-2、PC3)和前列腺正常上皮细胞RWPE-1,分别对其进行转染并分为si-NC组、si-HIF-1α组、 miR-NC组、miR-129组、si-HIF-1α+anti-miR-NC组、HIF-1α+anti-miR-129组、 si-HIF-1α+anti-miR-129组。采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA-HIF-1α、miR-129表达，构建抑制lncRNA-HIF-1α表达的PC3细胞，采用CCK-8法、Transwell检测细胞增殖、侵袭情况，Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、P21、P27、基质金属蛋白酶(MMP)-14、MMP-9、MMP-2蛋白表达。结果 与正常前列腺组织相比，前列腺癌组织中lncRNA-HIF-1α表达明显升高，miR-129表达明显降低(P<0.05)。与前列腺正常上皮细胞RWPE-1相比，前列腺癌细胞C4-2、LNCaP、DU145、PC3中lncRNA-HIF-1α呈明显高表达，miR-129呈明显低表达(P<0.05)。与si-NC组相比，si-HIF-1α组lncRNA HIF-1α表达水平、CyclinD1、OD值、MMP-14、MMP-9、MMP-2蛋白表达、侵袭的细胞数明显下降，P21、P27蛋白表达明显升高(P<0.05)。与miR-NC组相比，miR-129组miR-129表达水平、MMP-14、MMP-9、MMP-2蛋白表达、侵袭的细胞数明显下降，P27、P21蛋白表达明显上升(P<0.05)。经双荧光素酶试验报告显示，miR-129明显降低HIF-1α荧光素酶活性(P<0.05)。相较si-NC组，lncRNA-HIF-1α抑制表达会明显降低PC3细胞中的miR-129表达(P<0.05),相较si-HIF-1α+anti-miR-NC组，si-HIF-1α+anti-miRNA-146a组明显升高侵袭的细胞数、MMP-14、CyclinD1、MMP-9、MMP-2蛋白表达、OD值，明显降低P21、P27蛋白表达(P<0.05)。结论 干扰lncRNA-HIF-1α表达水平，可经调控miR-129表达，进而抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭。
2024年17期 v.44 4219-4223页 [查看摘要][在线阅读][下载 1136K] [下载次数：110 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 陈运起;吴钟伟;赵圣吉;李堪董;王敢;钟江华;
目的 探究微小RNA(miR)-132、miR-27b对缺血性心力衰竭大鼠心肌重构、心功能改变的影响及机制。方法 选取SD大鼠50只，随机分为假手术(Sham)组、模型(Model)组、腺病毒介导的miR-132过表达(miR-132 mimics)组、腺病毒介导的miR-27b过表达(miR-27b mimics)组及腺病毒介导的miR-132、miR-27b过表达(miR-132+miR-27b mimics)组；除去Sham组，其他各组均做缺血性心力衰竭模型，实验结束后，观察各组日常状态，检测其血压、心率和超声心动图相关指标[射血分数(EF)、收缩分数(FS)、舒张早期二尖瓣血流速与舒张晚期的血流速度比值(E/A)、心室舒张末期室间隔厚度(IVSd)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期直径(LVIDs)];苏木素-伊红(HE)染色观察心肌病理改变，流式细胞仪检测心肌细胞凋亡指数(AI);实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测心肌组织内miR-132、miR-27b mRNA表达；Western印迹检测心肌重构相关蛋白[胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、CollagenⅢ、基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-2、MMP-9]表达水平；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织内炎症因子[白细胞介素(IL)-18、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]水平。结果 Sham组一切正常，Model组呼吸困难喘息、体质量减轻、毛发光泽减少、精神萎靡、活动减少现象；miR-132 mimics组上述症状得到缓解，miR-27b mimics组加重，miR-132过表达可以逆转miR-27b mimics组表现；与Sham组相比，Model组心肌组织内miR-132 mRNA表达明显下调，miR-27b mRNA表达明显上调，收缩压、舒张压、心率、EF、FS、E/A明显下调，LVEDV、LVIDs、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、AI、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-1、MMP-2、MMP-9表达均明显上调(均P<0.05);与Model组相比，miR-132 mimics组收缩压、舒张压、心率、EF、FS、E/A明显上调，LVEDV、LVIDs、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、AI、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-1、MMP-2、MMP-9表达均明显下调(均P<0.05);miR-27b mimics组收缩压、舒张压、心率、EF、FS、E/A水平明显下调，LVEDV、LVIDs、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、AI、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-1、MMP-2、MMP-9表达明显上调(P<0.05);miR-132过表达可以逆转miR-27b mimics组因子变化趋势，明显上调收缩压、舒张压、心率、EF、FS、E/A水平，明显下调LVEDV、LVIDs、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、AI、CollagenⅠ、CollagenⅢ、MMP-1、MMP-2、MMP-9表达(P<0.05)。结论 miR-132为心力衰竭大鼠心肌重构发展抑制因子，miR-27b为促进因子，二者调控心肌重构发展、心功能变化与心肌细胞凋亡、炎症反应、心肌纤维化密切相关。
2024年17期 v.44 4224-4229页 [查看摘要][在线阅读][下载 1298K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 庞茜茜;刘斐;胡亚丽;项保利;姜爱雯;刘玲;汤建华;
目的 探讨莫西沙星联合头孢哌酮舒巴坦对鲍曼不动杆菌(AB)肺炎大鼠肺损伤的影响及其机制。方法 建立AB肺炎大鼠模型，50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、莫西沙星组、头孢哌酮舒巴坦组、联合组各10只。除正常对照组，其余组均采用10~8 CFU/ml AB悬液经鼻吸入法构建大鼠肺炎模型。莫西沙星组腹腔注射莫西沙星42 mg/kg;头孢哌酮舒巴坦组腹腔注射头孢哌酮舒巴坦200 mg/kg;联合组(腹腔注射42 mg/kg莫西沙星+200 mg/kg头孢哌酮舒巴坦);正常对照组及模型组给予等量生理盐水，各组均给药7 d。第7天检测各组肺组织中细菌含量，外周血中白细胞计数及中性粒细胞百分比。计算各组肺湿重与体质量比值，苏木素-伊红(HE)染色检测各组肺组织病理学变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-10水平。免疫荧光检测炎症相关通路Toll样受体(TLR)4/核因子-κB p65亚基(NF-κB p65)阳性表达。试剂盒检测各组肺组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平，2′,7′-二氯荧光素(DHC)荧光探针法检测各组肺组织中活性氧(ROS)相对水平。结果 与单一用药组AB含量相比，联合组肺组织中AB含量显著降低(P<0.05)。与单一用药组白细胞计数、中性粒细胞百分比相比，联合组白细胞计数及中性粒细胞百分比均显著降低(均P<0.05)。联合组肺组织肺泡、肺泡管和肺泡囊结构均较清晰，可见完整的环形平滑肌，肺间质增生减轻、肺泡腔和管腔内仍见有少量的炎性浸润，炎症浸润评分显著降低(均P<0.05)。TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著减少，IL-10显著增加，TLR4及NF-κB p65阳性表达显著降低(均P<0.05)。MDA和ROS含量显著下降，GSH、SOD显著增加(均P<0.05)。结论 莫西沙星联合头孢哌酮舒巴坦能够缓解AB肺炎大鼠的肺损伤，其机制可能是抑制炎症水平、缓解氧化应激。
2024年17期 v.44 4229-4234页 [查看摘要][在线阅读][下载 1540K] [下载次数：159 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 朱满华;林星镇;彭天忠;何志芳;袁娟;周峰;
目的 探究舒经活血胶囊对脊髓损伤大鼠运动功能恢复及对大鼠脊髓损伤后神经营养因子(NT)-3、神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达调控机制。方法 选取45只SD大鼠随机分为假手术组、舒筋活血胶囊组、脊髓损伤组3组，每组15只。假手术组不损伤暴露脊髓，其余两组均以改良艾伦(Allen)法建立脊髓损伤模型，造模术后第7、14、21、28 d时，采用脊髓损伤的行为学(BBB)评分对大鼠肢体功能进行评分，在28 d对大鼠脊髓组织进行取材，以苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠脊髓病理变化，免疫荧光检测NT-3、NGF和BDNF阳性细胞情况，Western印迹检测NT-3、NGF和BDNF蛋白表达情况。结果 脊髓损伤组、舒筋活血胶囊组术后第7、14、21、28天的BBB评分均明显低于假手术组(P<0.05);而脊髓损伤组与舒筋活血胶囊组在建模后，肢体功能开始逐渐恢复，其中舒筋活血胶囊组术后7、14、21、28 d的BBB评分明显更高，其肢体功能恢复情况显著更好(P<0.05);脊髓损伤组HE染色检测结果显示神经细胞破坏、肿胀，且有炎症细胞浸润，水肿严重，组织间隙增宽，舒筋活血胶囊组的神经细胞相对损伤较轻，神经细胞恢复较快；建模28 d后，假手术组只有少量的NT-3、NGF、BDNF阳性细胞；与假手术组相比，脊髓损伤组与舒筋活血胶囊组NT-3、NGF、BDNF阳性细胞数目均显著更多(P<0.05);而与脊髓损伤组相比，舒筋活血胶囊组NT-3、NGF、BDNF阳性细胞数目增加更为显著(P<0.05);与假手术组相比，脊髓损伤组与舒筋活血胶囊组NT-3、NGF、BDNF蛋白相对表达水平则明显上升(P<0.05);同时与脊髓损伤组相比，舒筋活血胶囊组NT-3、NGF、BDNF蛋白相对水平显著更高(P<0.05)。结论 舒筋活血胶囊可对脊髓损伤后的大鼠肢体功能起到修复效果，其可能通过促进NT-3、NGF、BDNF的分泌，进而激活与其相关的下游信号通路，促进轴突再生、再髓鞘化、神经细胞再生、存活。
2024年17期 v.44 4234-4238页 [查看摘要][在线阅读][下载 1339K] [下载次数：235 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 程明;冯均伟;向桃;贾龙;薛志远;曾玲;
目的 基于骨微结构参数探讨骨质疏松腰椎骨折大鼠的有限元分析。方法 10只大鼠均建立骨质疏松腰椎骨折模型，比较骨折区域及非骨折区域的骨微结构相关参数的差异性，对骨质疏松性腰椎骨折腰椎构建10个模型，进行加载，按照有限元模型中的前5.0%、2.0%、1.0%及0.5%应力的平均值作为最高应力值，后采用多元回归分析了解骨小梁有限元模型指数的相关因素。结果 与非骨折区域相比，骨折区域在骨微结构参数差异具有统计学意义(P<0.05);各个有限元模型中平均弹性模量为1 741.42 MPa,平均单元数221 971,平均节点数59 813;前5.0%、2.0%、1.0%、0.5%中以前5%应力单元的平均应力最接近，认为该模型可以较好反映骨小梁的应力情况。多元回归分析得到骨小梁结构模型指数具有较高的相关性(P=0.001,R~2=0.806)。结论 骨微结构中骨小梁结构指数是影响骨小梁有限元模型最重要的指标之一，其数值最大表明骨小梁数量越多，应力最大，在骨质疏松性腰椎骨折中分析骨小梁结构指数对疾病的发生发展具有重要作用。
2024年17期 v.44 4239-4242页 [查看摘要][在线阅读][下载 1113K] [下载次数：189 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 彭兴华;李章红;李海平;蔡隆仁;
目的 探讨黄芩苷调控Notch通路对冠心病大鼠模型血小板功能、血脂水平及载脂蛋白(Apo)AⅠ,ApoB的影响。方法 选取36只SPF级大鼠，其中24只通过高脂饮食构建冠心病大鼠模型，将冠心病模型大鼠随机分为模型组和黄芩苷组，每组12只。另外12只大鼠为对照组。黄芩苷组给予50 mg/kg黄芩苷灌胃，模型组和对照组给予等量蒸馏水灌胃，均1次/d,连续给药2 w,期间各组均常规喂养。用小动物超声仪检测左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)。采用酶链免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆血栓素(TX)B2、6酮前列腺素(6-k-PG)Flα水平。采用酶比色法检测ApoAⅠ、ApoB水平。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌组织病理形态学。采用Western印迹法检测Notch通路相关蛋白。结果 与对照组相比，模型组LVESD、LVEDD表达水平、血清TXB2、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoB水平、心肌细胞凋亡率、Notch、胱天蛋白酶(Caspase)-1蛋白表达均升高，LVEF表达、血清6-k-PGF1α、ApoAⅠ、高度度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、Ki67蛋白表达水平均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比，黄芩苷组LVESD、LVEDD表达、血清TXB2、TC、TG、LDL-C、ApoB水平、心肌细胞凋亡率、Notch、Caspase-1蛋白表达均降低，LVEF表达、血清6-k-PGF1α、ApoAⅠ、HDL-C水平、Ki67蛋白表达均升高，差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比，模型组心肌细胞明显肥大增厚，细胞间距增大，心肌细胞数减少，血管壁增厚，炎症细胞浸润。与模型组相比，黄芩苷组炎症细胞浸润均明显减少，症状得到改善。结论 黄芩苷可以通过抑制Notch通路降低心肌细胞凋亡，改善心功能血脂状况及降低Apo水平，抑制心肌细胞凋亡率。
2024年17期 v.44 4243-4247页 [查看摘要][在线阅读][下载 1190K] [下载次数：295 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 冯波;王聪;卢增辉;李武龙;郭艳;
目的 研究大鼠糖尿病足溃疡(DFU)模型皮肤组织中miRNA对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)的调控作用。方法 通过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方式建立糖尿病大鼠模型，在第15天后再次测量大鼠血糖，以空腹血糖>15 mmol/L为大鼠造模成功的标准。糖尿病大鼠模型构建成功后，在大鼠双侧后肢足背部消毒后切除5 mm×5 mm的全层皮肤，制备DFU模型；对照组则不进行创面造模，正常饲养。4 d后取溃疡组织和对照组相同部位的组织进行miRNA高通量测序并针对PI3K/AKT通路进行数据分析；苏木素-伊红(HE)染色观察溃疡组织和对照组织的状态；TUNEL法检测细胞凋亡；Western印迹检测胰岛素样生长因子(IGF)-1、PI3K、磷酸化(p)-AKT、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)等蛋白表达。结果 HE染色显示，模型组造模处组织相对于对照组足背皮肤组织表现出溃疡状态。TUNEL染色结果显示，对照组组织中细胞凋亡很少，模型组组织中则有显著的细胞凋亡现象。Western检测结果显示，对照组组织中IGF-1、PI3K、p-AKT、p-mTOR等蛋白表达都显著低于模型组组织(P<0.05)。miRNA高通量测序检测得到在对照组和模型组之间显著差异表达的miRNA共224个。在差异表达miRNA中筛选rno-miR-339-5p, rno-miR-34a-5p, rno-miR-503-5p, rno-miR-146b-5p, rno-miR-322-5p, rno-miR-149-5p, rno-novel-53-mature, rno-miR-125a-5p, rno-miR-339-3p, rno-miR-3473,rno-novel-30-mature, rno-miR-326-3p, rno-miR-134-5p等与PI3K-AKT信号通路相关的miRNA,并根据这些miRNA的靶基因将这些miRNA标示在京都基因和基因组百科全书(KEGG)中的PI3K/AKT通路上。结论 糖尿病大鼠足背溃疡皮肤组织中，PI3K/AKT通路表达上调，对PI3K/AKT起调控作用的miRNA表达也显著变化，从免疫反应、细胞外基质(ECM)-整合素(Integrin)、生长因子和间质上皮转化等多个角度起到促进创口愈合的效果。
2024年17期 v.44 4247-4252页 [查看摘要][在线阅读][下载 1834K] [下载次数：445 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 刘围围;张玉;夏爱超;王艳;陈文明;赵然尊;石蓓;
目的 探讨甲基转移酶样蛋白(METTL)3调控氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导下大鼠主动脉内皮细胞(RAECs)的增殖作用。方法 采用10μg/ml ox-LDL处理RAECs 24 h模拟动脉粥样硬化内皮损伤模型，利用小干扰RNA(siRNA)敲减RAECs中的METTL3。将实验分为对照(control)组、ox-LDL组、siRNA-NC阴性对照(siNC)组及沉默METTL3(siMETTL3)组。采用流式细胞术检测细胞增殖；Transwell试验检测细胞迁移；Western印迹检测蛋白METTL3、张力蛋白同源物(PTEN)相对表达量。结果 ox-LDL可诱导RAECs细胞内METTL3表达明显上调(P<0.05)。与ox-LDL组相比，siMETTL3组细胞增殖、迁移明显减少，细胞内PTEN表达明显上调(P<0.05)。结论 METTL3可能通过PTEN调节ox-LDL诱导主动脉内皮细胞的增殖、迁移。
2024年17期 v.44 4252-4257页 [查看摘要][在线阅读][下载 1629K] [下载次数：171 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 干定云;吴军;周曼;陈婉;姜雯;
目的 探讨miR-217靶向转运因子7类似物(TCF7L)2调控Wnt/β-catenin通路，并联合柔红霉素(DNR)对急性髓系白血病(AML)的抑制作用。方法 构建mimic NC和miR-217 mimic载体转染至HL-60细胞中，q聚合酶链反应(PCR)检测转染效率。不同浓度的DNR处理细胞24、48 h, CCK8检测细胞增殖能力。将细胞分为对照组、mimic NC组、miR-217 mimic组、DNR组和miR-217 mimic+DNR组，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞增殖迁移；qPCR检测miR-217、TCF7L2、Wnt3A和β-catenin表达，Western印迹检测Wnt3a、β-catenin、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达，双荧光素酶验证miR-217和TCF7L2的关系。结果 DNR的最佳处理浓度为5μmol/L,时间48 h。与对照组相比，miR-217 mimic组和DNR组细胞凋亡率、miR-217和Bax蛋白相对表达量显著升高，而TCF7L2、Wnt3a和β-catenin mRNA及Wnt3a、β-catenin和Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(均P<0.05);与DNR组相比，miR-217 mimic+DNR组细胞凋亡率、miR-217和Bax蛋白相对表达量显著升高，TCF7L2、Wnt3a和β-catenin mRNA及Wnt3a、β-catenin和Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因表明miR-217与TCF7L2之间存在靶向调控关系。结论 miR-217靶向TCF7L2调控Wnt/β-catenin信号通路，抑制耐药，从而抑制AML细胞增殖、侵袭和迁移，促进细胞凋亡。
2024年17期 v.44 4257-4261页 [查看摘要][在线阅读][下载 1323K] [下载次数：204 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 宫晓锦;胡同秀;杨玉婕;于飞;
目的 探究米非司酮(RU486L)通过调节miR-492/Krüppel样因子(KLF)5/核呼吸因子(Nrf)1轴对子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的影响。方法 按照数字随机法将细胞分为HEC-1A组(DMEM培养基+浓度为0μm/ml的RU486培养)、RU486 L组(DMEM培养基+浓度为10μm/ml的RU486培养)、RU486 M组(DMEM培养基+浓度为20μm/ml的RU486培养)、RU486 H组(DMEM培养基+浓度为40μm/ml的RU486培养)。取对数生长的HEC-1A细胞培养后分别将si-miR-492、si-NC、miR-492 mimics转染至HEC-1A细胞，将细胞分为si-miR-492组、si-NC组和miR-492 mimics组。检测细胞中miR-492表达[反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法];检测细胞增殖能力(MTT法);检测细胞侵袭能力(Transwell法);检测细胞中KLF5和Nrf1蛋白表达(Western印迹法);双荧光素酶报告基因验证miR-492和KLF5、Nrf1的靶向关系。结果 与hEEC细胞相比，HEC-1A细胞miR-492表达明显升高(P<0.05)。与HEC-1A组相比，si-miR-492组miR-492表达显著降低(P<0.05);RU486 L组、RU486 M组和RU486 H组细胞增殖、侵袭、KLF5、Nrf1蛋白显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比，si-miR-492组细胞增殖、侵袭、KLF5、Nrf1显著降低(P<0.05)。细胞转染KLF5-WT发现，miR-492组比miR-NC组显著升高(P<0.05);miR-492组与miR-NC组突变体无显著差异(P>0.05);细胞转染Nrf1-WT发现，miR-492组比miR-NC组显著高(P<0.05);miR-492组与miR-NC组突变体无显著差异(P>0.05)。与RU486 H组比较，miR-492组细胞增殖、侵袭、KLF5、Nrf1显著升高(P<0.05)。结论 miR-492/KLF5/Nrf1轴可通过抑制miR-492/KLF5/Nrf1轴抑制子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭。
2024年17期 v.44 4262-4266页 [查看摘要][在线阅读][下载 1319K] [下载次数：94 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 王月;邵月;权兴苗;宋春侠;徐立伟;时菁静;
目的 探究益气升清方调节RAS同源基因家族成员(Rho)A/Rho相关蛋白激酶(ROCK)信号通路对脑卒中大鼠血脑屏障(BBB)和神经炎症的影响。方法 随机选择15只大鼠作为假手术组(S组),其余大鼠构建大脑中动脉阻塞(MCAO)模型，将构建成功的MCAO大鼠随机分为MCAO组、低剂量药物组(3.47 g/kg)、中剂量药物组(6.93 g/kg)、高剂量药物组(13.86 g/kg),高剂量药物+溶血磷脂酸(LPA,RhoA/ROCK信号通路激活剂LPA)组(50μmol/L)各20只，连续给药8 w。评估神经功能受损情况和脑梗死体积；酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子水平；免疫荧光染色检测小胶质细胞活化；伊文思蓝(EB)法检测BBB通透性；Western印迹检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9及RhoA/ROCK通路蛋白水平。结果 与S组相比，MCAO组神经功能评分及梗死体积比、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、Iba-1阳性细胞数量、EB渗出量、MMP-2及MMP-9蛋白水平、RhoA、p-ROCK/ROCK蛋白水平均显著升高(P<0.05);与MCAO组相比，低、中、高剂量药物组神经功能评分及梗死体积比、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、Iba-1阳性细胞数量、EB渗出量、MMP-2及MMP-9蛋白水平、RhoA、p-ROCK/ROCK蛋白水平均显著降低(P<0.05),且高剂量药物组作用效果最好；LPA消除了高剂量药物组对脑卒中大鼠的保护作用。结论 益气升清方可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路改善脑卒中大鼠BBB通透性和神经炎症。
2024年17期 v.44 4266-4270页 [查看摘要][在线阅读][下载 1495K] [下载次数：513 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 贾慧宇;常永峰;韩培天;徐俊华;
目的 探究miR-199a通过干预细胞周期通路对心肌梗死的调控作用机制。方法 将SPF级Balb/c小鼠分为对照组、模型组和miR-199a组各10只，模型组和miR-199a组建立心肌梗死模型，miR-199a组建模后尾静脉注射miR-199a质粒，模型组注射等量生理盐水，2 w后进行实验。分别采用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色评估各组病理损伤程度和心肌纤维化水平；流式细胞检测各组心肌细胞存活、早期凋亡、晚期凋亡，同时检测细胞周期G0/G1期、S期、G2/M期比例；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞周期相关分子G1/S-特异性周期蛋白(Cyclin)D1和周期蛋白依赖性激酶(CDK)1 mRNA表达水平，Western印迹检测CyclinD1和CDK1蛋白表达水平。结果 与对照组相比，模型组心肌病理损伤程度明显升高，纤维化水平明显升高，细胞存活明显降低，早期凋亡和晚期凋亡明显增加，细胞周期G0/G1期显著增加，S期和G2/M期显著降低，心肌组织细胞周期蛋白CyclinD1、CDK1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组相比，miR-199a组心肌病理损伤程度明显降低，纤维化水平明显降低，细胞存活比例明显升高，早期凋亡和晚期凋亡比例明显降低，细胞周期G0/G1期比例明显降低，S期和G2/M期比例明显升高，心肌组织CyclinD1、CDK1mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 过表达miR-199a对心肌梗死小鼠心肌具有保护作用，其机制可能与细胞周期调控及CyclinD1/CDK1通路高表达有关。
2024年17期 v.44 4271-4274页 [查看摘要][在线阅读][下载 1419K] [下载次数：126 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 赵华;唐丽丽;
目的 探讨丹参提取物对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其机制。方法 选取前列腺癌细胞随机分为空白组、丹参提取物低、中、高剂量组、阳性对照组，采用CCK-8、流式实验、Transwell实验、划痕实验观察对各组细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力进行检测，采用Western印迹和聚合酶链反应(PCR)检测各组细胞磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路相关蛋白和mRNA表达。结果 与空白组比较，丹参提取物各剂量组增殖抑制率明显升高，且呈明显剂量依赖性(P<0.05);阳性对照组与丹参提取物高剂量组差异无统计学意义(P>0.05);与空白组相比，丹参提取物各剂量组凋亡率明显升高，且随着剂量增高而明显升高(P<0.05);阳性对照组与丹参提取物高剂量组以上指标，差异无统计学意义(P>0.05);与空白组相比，丹参提取物各剂量组侵袭细胞数明显升低，且随着剂量的增高而明显降低(P<0.05);阳性对照组与丹参提取物高剂量组以上指标差异无统计学意义(P>0.05);与空白组相比，丹参提取物各剂量组迁移率明显降低，且随着剂量的增高而明显降低(P<0.05);阳性对照组与丹参提取物高剂量组以上指标差异无统计学意义(P>0.05);与空白组相比，丹参提取物各剂量组PI3K、AKT、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白及mRNA表达明显降低，且随着剂量的增高而明显降低(P<0.05);阳性对照组与丹参提取物高剂量以上指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 丹参提取物可抑制前列腺癌细胞增殖，促进其凋亡反应，并影响细胞的浸润和转移的能力，可能是通过调控PI3K/AKT信号通路实现的。
2024年17期 v.44 4275-4279页 [查看摘要][在线阅读][下载 1449K] [下载次数：252 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 任雅芳;禹萌;张洪涛;付胜奇;刘冰;刘海涛;张淑玲;
目的 探讨银杏叶提取物对人脑血管外膜成纤维细胞凋亡和增殖的作用及其与微小RNA(miR)-122的调控关系。方法 使用干扰素(IFN)-α刺激人脑血管外膜成纤维细胞，将人脑血管外膜成纤维细胞分为Con组、IFN-α组、IFN-α+Gin-L组、IFN-α+Gin-M组、IFN-α+Gin-H组、IFN-α+anti-miR-NC组、IFN-α+anti-miR-122组、IFN-α+Gin+miR-NC组、IFN-α+Gin+miR-122组。使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、流式细胞术测定增殖和凋亡；Western印迹测定B细胞淋巴瘤相关X蛋白(Bax)、cleaved-胱天蛋白酶(caspase)3表达；qRT-聚合酶链反应(PCR)检测miR-122相对表达水平。结果 相较于Con组，IFN-α组细胞活性下降，cleaved-caspase3、Bax蛋白表达和凋亡率增加，miR-122相对表达增加，差异有统计学意义(P<0.05)。与IFN-α组相比，IFN-α+Gin-L组、IFN-α+Gin-M组、IFN-α+Gin-H组细胞活性增加，凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白表达降低，miR-122相对表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与IFN-α+anti-miR-NC组比较，IFN-α+anti-miR-122组细胞活性增加，凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与IFN-α+Gin+miR-NC组比较，IFN-α+Gin+miR-122组胞活性降低，凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白表达增加，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 银杏叶提取物可能通过降低miR-122表达阻碍IFN-α诱导的人脑血管外膜成纤维细胞凋亡并促进增殖。
2024年17期 v.44 4279-4283页 [查看摘要][在线阅读][下载 1302K] [下载次数：154 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 张群妹;狄文玉;王海峰;焦路阳;鲁广建;
目的 探讨微小RNA(miR)-221-5p靶向维生素D受体(VDR)调控肾透明癌上皮细胞-间充质转化的潜在机制。方法 过表达或敲低miR-221-5p后，检测肾透明癌细胞786-O中VDR的表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-221-5p是否靶向VDR。过表达或敲低miR-221-5p及过表达VDR或敲低VDR后，检测786-O中上皮细胞-间充质转化标志蛋白[E-钙黏蛋白(Cadherin)、β-连环蛋白(Catenin)和紧密连接蛋白(ZO)-1]表达水平、线粒体功能相关蛋白[电压依赖性阴离子通道蛋白(VDAC)1、线粒体内膜中视神经萎缩症蛋白(OPA)1和线粒体钙离子单向转运蛋白(MCU)]的表达水平及线粒体呼吸水平[基础呼吸、三磷酸腺苷(ATP)相关呼吸和最高呼吸]。结果 过表达miR-221-5p在肾透明癌细胞中导致VDR的mRNA和蛋白水平明显下降(P<0.05),而敲低miR-221-5p则相反。进一步的双荧光素酶报告表明，miR-211-5p mimic能够针对野生型VDR mRNA-3′UTR组明显降低荧光素酶活性(P<0.05),但在突变型VDR mRNA-3′UTR组无明显差异(P>0.05)。此外，miR-221-5p过表达或VDR的敲低会导致肾透明癌细胞中上皮细胞-间充质转化标志蛋白的水平明显上升，而反之则明显下降(P>0.05),共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上蛋白水平未发生显著变化(P>0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低会导致线粒体功能相关蛋白水平明显下降，反之则明显上升(P<0.05),但是共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上指标未发生显著变化(P>0.05)。miR-221-5p过表达或VDR敲低导致肾透明癌细胞中线粒体呼吸相关参数明显下降，反之则明显上升(P<0.05),但是共表达或共敲低miR-221-5p和VDR时以上指标未发生显著变化(P>0.05)。结论 miR-221-5p通过调控VDR表达水平影响肾透明癌细胞的上皮细胞-间充质转化、线粒体功能及线粒体呼吸。
2024年17期 v.44 4283-4286页 [查看摘要][在线阅读][下载 1071K] [下载次数：79 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 陈璇;邵懿;邹佳华;
目的 探究微小RNA(miR)-144调控Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB信号传导通路对肺癌裸鼠的负向免疫调节作用的影响。方法 40只裸鼠分为4组：对照组、miR-144组、TLR4组和miR-144+TLR4组(n=10),采用皮下注射A549细胞构建肺癌裸鼠模型，对照组细胞转染阴性对照质粒，miR-144组细胞转染miR-144质粒，TLR4组细胞转染TLR4质粒，miR-144+TLR4组细胞转染miR-144和TLR4质粒。测定建模28 d的肿瘤增殖情况、肿瘤组织中Ki67和基质金属蛋白酶(MMP)2蛋白、外周血T淋巴细胞亚群及肿瘤组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平，并通过双荧光素酶报告验证miR-144与TLR4的靶向关系。结果 miR-144组miR-144过表达，TLR4组过表达TLR4,miR-144+TLR4组miR-144和TLR4均过表达，建模成功。建模28 d裸鼠肿瘤体积、质量、肿瘤组织中Ki67和MMP2蛋白表达、CD8~+水平比较miR-144组<miR-144+TLR4组<对照组<TLR4组(P<0.05);裸鼠外周血T淋巴细胞CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平比较miR-144组>miR-144+TLR4组>对照组>TLR4组(P<0.05);肿瘤组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平比较miR-144组<miR-144+TLR4组≈对照组<TLR4组(P<0.05);双荧光素酶研究显示miR-144与TLR4的靶向结合。结论 miR-144可通靶向抑制TLR4/NF-κB通路减轻免疫抑制，抑制肺癌的增殖和转移。
2024年17期 v.44 4287-4291页 [查看摘要][在线阅读][下载 1314K] [下载次数：163 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张红;康朋朋;种肖宇;胡景玉;张长庚;
目的 探究子宫内膜样腺癌侵袭、迁移作用的调控机制。方法 选取子宫内膜样腺癌细胞HEC-1-A、AN3-CA及人类子宫内膜正常上皮细胞CP-H058为研究细胞，分为对照组、模型组、mimic-NC组、mimic-miR组、mimic-miR+oe-NC组、mimic-miR+oe-FOXM1组。采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常人子宫内膜上皮细胞和子宫内膜样腺癌细胞中miR-214-3p的差异表达，构建miR-214-3p mimic转染至子宫内膜样腺癌细胞并使用RT-qPCR验证其转染效率。通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡、迁移和侵袭能力，通过Western印迹检测叉头盒蛋白(FOX)M1蛋白表达水平。利用生物信息学预测网站预测miR-214-3p的靶基因FOXM1,采取双荧光素酶精准靶点验证实验。miR-214-3p mimic和pcDNA3.1-FOXM1共同转染至子宫内膜样腺癌细胞中验证miR-214-3p通过调控靶基因FOXM1对子宫内膜样腺癌进展产生抑制作用。结果 miR-214-3p在子宫内膜样腺癌细胞中明显低表达(P<0.05);在子宫内膜样腺癌细胞中过表达miR-214-3p明显抑制细胞活力、迁移、侵袭，明显促进细胞凋亡(P<0.05);miR-214-3p靶向负调控FOXM1,高表达miR-214-3p和高表达FOXM1联合处理子宫内膜样腺癌细胞部分逆转了以上细胞行为。结论 miR-214-3p介导FOXM1抑制子宫内膜样腺癌侵袭、转移。
2024年17期 v.44 4291-4296页 [查看摘要][在线阅读][下载 1840K] [下载次数：70 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 郭晓娜;张楠;牛美兰;
目的 探讨水蛭素对糖尿病肾病(DN)模型大鼠糖代谢水平的影响及对肾功能的保护作用。方法 SPF级雄性SD大鼠70只，采用数字表法随机分为空白组(10只),造模组(60只)。造模组采用高糖高脂饮食+单次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg,诱导DN模型大鼠。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组、水蛭素低、中、高剂量组、贝那普利组，每组10只，灌胃给药干预10 w。观察各组一般状态，干预结束收集大鼠24 h尿量(UV)、血液、肾脏样本；检测大鼠血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素(Cys)-C、尿液β2-微球蛋白(β2-MG)等指标，计算肾脏肥大指数(KI);病理切片观察大鼠肾组织病理改变。结果 与空白组相比，模型组体质量明显降低，24 h UV、β2-MG、空腹血糖(FBG)、HbA1c、BUN、Scr、Cys-C水平及KI值显著增高(P<0.01)。与模型组相比，水蛭素中剂量组FBG、HbA1c、BUN、Scr、Cys-C、24 h UV、β2-MG水平、KI值明显降低(P<0.05,P<0.01),体质量无明显差异(P>0.05);水蛭素高剂量组体质量增加，但差异无统计学意义(P>0.05),其他各项指标均显著降低(P<0.01);观察大鼠肾组织病理切片，水蛭素中、高剂量组肾损伤明显减轻。结论 水蛭素具有保护DN大鼠肾功能的作用，其作用机制与降低DN大鼠血糖、HbA1c水平，延缓炎性因子对肾脏的损伤有关。
2024年17期 v.44 4297-4301页 [查看摘要][在线阅读][下载 1264K] [下载次数：452 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 李璐;陈春艳;杨冬花;雷蕾;夏桂玲;肖昌亮;
目的 探讨脉压增大对老年单纯收缩期高血压(ISH)大鼠肾脏纤维化的影响及其机制。方法 将10月龄SD雄性大鼠随机分为对照组、ISH组各7只，应用华法林和维生素K1造模6 w。运用苏木素-伊红(HE)、Masson及免疫组化染色观察肾脏形态学及纤维化情况，免疫组化了解转化生长因子(TGF)-β1、胶原(COL)-Ⅲ蛋白表达水平。结果 实验末，与对照组比较，ISH组收缩压、脉压、血肌酐、肾小球纤维化指数及肾小管间质纤维化指数均明显升高(均P<0.05)。免疫组化结果显示，与对照组比较，ISH组肾脏皮质、髓质中TGF-β1及COL-Ⅲ蛋白表达均明显增加(均P<0.05)。结论 脉压增大可引起老年单纯收缩期高血压大鼠肾小球硬化、间质纤维化导致肾损害，其机制可能与TGF-β1有关。
2024年17期 v.44 4301-4305页 [查看摘要][在线阅读][下载 3621K] [下载次数：151 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张献彩;刘子宸;王艳盛;李永刚;
目的 探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用及其对NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3通路的影响。方法 雄性大鼠随机分为对照(Control)组、糖尿病肾病(DN)组、二甲双胍(Metformin)组、EGCG 50、100、200 mg/kg组，链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病模型，在16 w内称量小鼠体质量变化，血糖仪检测空腹血糖水平，行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),取尿液及血样，试剂盒检测24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血胰岛素、8-羟基脱氧尿苷(OHdG)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18水平，取肾脏组织，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)含量，苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理变化，末端脱氧核苷酸转移酶接到dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色检测肾脏组织细胞凋亡，Western印迹检测NLRP3、胱天蛋白酶(Caspase)-1、cleaved Caspase-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。另设DN+EGCG、DN+MCC950、DN+MCC950+EGCG组，通过抑制NLRP3通路评估EGCG在NLRP3通路中的作用。结果 与Control组相比，DN组空腹血糖水平明显升高，空腹胰岛素水平明显下降，血糖清除能力明显下降，24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平明显升高，肾脏出现病理样改变，同时细胞凋亡增加，此外尿液8-OHdG水平明显升高，肾脏SOD含量明显减少，MCP-1、IL-6、IL-1β、IL-18水平明显升高，NLRP3和Caspase-1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),经过二甲双胍或EGCG干预治疗后，上述指标均得到扭转。通过NLRP3抑制剂MCC950抑制NLRP3通路的激活，可抑制24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮的产生，与EGCG联合使用抑制效果更为明显。结论 EGCG对小鼠糖尿病肾病的缓解作用部分与其对NLRP3通路的抑制作用有关。
2024年17期 v.44 4306-4311页 [查看摘要][在线阅读][下载 1535K] [下载次数：323 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 王柯;叶寒露;
目的 基于Toll样受体(TLR)4/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子(NF)-κB信号通路探究结筋点刃针松解法对膝骨关节炎(KOA)兔股四头肌生物力学行为和炎症反应的影响。方法 采用改良Videman法构建兔模型，随机分为模型组、结筋点刃针松解法组、脂多糖(LPS,TLR4激活剂，3.18 mg/kg)组、结筋点刃针松解法+LPS(3.18 mg/kg)组，每组10只，另取10只新西兰兔不做处理作为对照组，分组治疗干预后，采用膝骨性关节病病情程度指数(Lequesne MG)的膝关节级别评估法对各组兔进行行为学评分；采用超声检测各组兔股四头肌肌肉厚度、横截面积及弹性应变率；采用力学试验机检测各组兔股四头肌生物力学指标：肌腱蠕变率、应力松弛率、最大应力、最大应变及弹性模量；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组兔血清及股四头肌炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-8水平；采用Western印迹实验检测各组兔股四头肌组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较，模型组兔股四头肌肌肉厚度、横截面积、肌腱最大应力、弹性模量明显降低，局部疼痛、步态改变、关节活动、关节肿胀评分、弹性应变率、肌腱蠕变率及应力松弛率、最大应变、血清及股四头肌炎症因子IL-6、IL-8水平、股四头肌组织TLR4、MyD88蛋白表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(P<0.05)。与模型组比较，结筋点刃针松解法组兔股四头肌肌肉厚度、横截面积、肌腱最大应力与弹性模量明显升高，局部疼痛与步态改变、关节活动、关节肿胀评分、弹性应变率、肌腱蠕变率及应力松弛率、最大应变、血清及股四头肌炎症因子IL-6、IL-8水平、股四头肌组织TLR4、MyD88蛋白表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65明显降低(P<0.05);LPS组兔股四头肌肌肉厚度、横截面积、肌腱最大应力与弹性模量明显降低，局部疼痛与步态改变、关节活动、关节肿胀评分、弹性应变率、肌腱蠕变率及应力松弛率、最大应变、血清及股四头肌炎症因子IL-6、IL-8水平、股四头肌组织TLR4、MyD88蛋白表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(均P<0.05)。与结筋点刃针松解法组比较，结筋点刃针松解法+LPS组兔股四头肌肌肉厚度、横截面积、肌腱最大应力与弹性模量明显降低，局部疼痛与步态改变、关节活动、关节肿胀评分、弹性应变率、肌腱蠕变率及应力松弛率、最大应变、血清及股四头肌炎症因子IL-6、IL-8水平、股四头肌组织TLR4、MyD88蛋白表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(均P<0.05)。结论 结筋点刃针松解法治疗可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路而抑制炎症，从而修复KOA兔股四头肌形态，改善其肌肉生物力学行为。
2024年17期 v.44 4312-4316页 [查看摘要][在线阅读][下载 1111K] [下载次数：474 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 韩丽侠;杨晨晨;高志泽;宋冰;
目的 探讨NOD样受体蛋白(NLRP)3对小鼠骨质疏松及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法 动物实验：雌性C57BL/6和NLRP3基因敲除小鼠随机分为空白对照(NC)组、模型(S)组、NLRP3基因敲除(KO)组、NLRP3基因敲除骨质疏松(KS)组。S组和KS组建立去卵巢小鼠骨质疏松模型。苏木素-伊红(HE)染色观察骨小梁结构，免疫组织化学检测各组碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子(RUNX)2、PI3K、Akt及mTOR蛋白表达，Western印迹法测各组股骨中ALP、OCN、RUNX2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt及mTOR蛋白表达。细胞实验：小鼠前成骨细胞MC3T3-E1常规培养和传代后，分为常规(C)组、造模(Z)组、NLRP3抑制剂MCC950(M)组、MCC950+PI3K抑制剂LY294002(M+L)组、LY294002(L)组，除C组外，其他4组均用脂多糖(LPS)刺激。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中OCN、白细胞介素(IL)-1β和IL-18,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胱天蛋白酶(Caspase)-9、微管相关蛋白1轻链(LC)3和自噬相关蛋白(Beclin)1 mRNA表达，Western印迹法测各组NLRP3、PI3K、p-Akt及mTOR蛋白表达。结果 动物实验：HE染色发现，与NC组相比较，S组和KS组骨小梁分布不均匀，排列稀疏，数目明显变少；与S组相比，KS组改善了骨质疏松小鼠股骨骨小梁的分布与排列，病理损伤减轻。免疫组织化学检测发现，与NC组相比较，S组ALP、OCN、RUNX2表达明显下降，PI3K、Akt、mTOR表达明显升高(P<0.05);与S组相比，KS组上述检测指标表达显著逆转(P<0.05)。Western印迹结果表明，与NC组相比，S组ALP、OCN、RUNX2蛋白表达水平明显降低，p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和mTOR蛋白表达水平明显增加(P<0.05);与S组相比，KS组上述检测指标表达显著逆转(P<0.05)。细胞实验：MCC950可明显提高LPS刺激MC3T3-E1细胞上清液中OCN含量，明显降低IL-1β、IL-18水平，明显升高LC3和Beclin1 mRNA表达，明显减少Caspase-9 mRNA及NLRP3、PI3K、p-Akt、mTOR蛋白表达(P<0.05)。结论 NLRP3基因敲除可以抑制小鼠骨质疏松的发生，其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。
2024年17期 v.44 4317-4322页 [查看摘要][在线阅读][下载 1865K] [下载次数：598 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 许国梁;章琪;潘书鸿;汪东树;
目的 探讨桔梗皂苷D对肝癌模型小鼠胆汁酸肝肠循环的作用。方法 采用二乙基亚硝胺建立肝癌小鼠模型，将造模成功小鼠随机分为模型组、顺铂组、桔梗皂苷D(低、中、高剂量)组各12只，顺铂组腹腔注射顺铂，剂量为10μg/g;低、中、高剂量组桔梗皂苷D剂量分别为10、20、40μg/g,灌胃给药。另取12只未造模的小鼠为对照组，每天灌胃同等体积生理盐水，持续2 w。处死小鼠，取肝组织和血清，肝组织采用苏木素-伊红(HE)染色后观察形态；采用全自动生化分析仪测定血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TB)水平，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中白细胞介素(IL)-6和转化生长因子(TGF)-β1水平。肝组织中核因子E2相关因子(Nrf)2和Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白(Keap)1 mRNA表达采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)测定，Nrf2和Keap1蛋白表达采用Westen印迹测定。结果 模型组肝组织有明显的病理性损伤，给药组肝组织损伤均显著减轻，且桔梗皂苷D不同剂量组具有明显剂量依赖性。与模型组相比，低、中、高剂量组血清中AST、ALT、TBA、TB、IL-6和TGF-β1水平均显著降低，肝组织中Keap1 mRNA和蛋白表达均显著降低，Nrf2 mRNA及蛋白表达明显升高，且均低、中、高剂量组呈明显剂量依赖性(均P<0.05)。结论 桔梗皂苷D可以通过下调Keap1表达水平，激活下游的抗氧化反应元件(ARE)信号显著改善肝癌模型小组胆汁酸肝肠循环。
2024年17期 v.44 4322-4326页 [查看摘要][在线阅读][下载 1379K] [下载次数：430 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]