- 王远涵;赵小乐;武淑琴;罗艳虹;余红梅;
目的 建立基于基因表达综合数据库(GEO)阿尔茨海默病(AD)溶酶体相关基因的随机森林和人工神经网络联合诊断模型并评价其效果。方法 收集GEO中AD患者的资料，使用随机森林筛选AD中溶酶体相关的特征基因，使用特征基因构建用于诊断AD的人工神经网络模型。对模型进行验证，通过曲线下面积分析评价模型的临床应用价值。同时，计算AD中免疫细胞的浸润情况，分析特征基因与免疫细胞浸润的关系。结果 在AD和正常样本中鉴定出20个溶酶体相关基因，最终通过随机森林筛选得到最相关的8个特征基因[淀粉样前体蛋白(APP)、艾杜糖-2-硫酸酯酶(IDS)、RAS致癌基因家族成员RAB6A、β-甘露糖苷酶(MANBA)、脱氧核糖核酸酶-2-β(DNASE2B)、RAB11家族相互作用蛋白(RAB11FIP)3、中性粒细胞胞质因子(NCF)4、衔接因子相关蛋白复合体1,γ2亚基(AP1G)2],并构建人工神经网络诊断模型。使用该模型，绘制了训练组和验证组诊断的受试者工作特征(ROC)曲线，曲线下面积分别为0.934和0.690。同时，对AD组和正常组进行免疫测定，结果显示AD中B细胞、中性粒细胞、自然杀伤细胞、浆细胞样树突细胞、辅助性T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、调节性T细胞、抗原呈递共抑制、抗原呈递共刺激、趋化因子C-C-基序受体、检查点、人类白细胞抗原、主要组织相容性复合体Ⅰ类分子、低度炎症、T细胞共抑制、T细胞共刺激、Ⅰ型干扰素反应、Ⅱ型干扰素反应高表达；而CD8~+T细胞、未成熟树突状细胞、肥大细胞、滤泡辅助性T细胞、Th1细胞则低表达。同时，DNASE2B、NCF4、RAB11FIP3、AP1G2、MANBA、RAB6A、IDS基因与免疫浸润中的1个或多个细胞及功能具有显著相关性。结论 构建的8个溶酶体相关基因的人工神经网络诊断模型可用于诊断AD。同时，特征基因影响AD的免疫浸润，可以为探索AD的治疗及相关机制提供新的视角。
2024年19期 v.44 4696-4704页 [查看摘要][在线阅读][下载 3197K] [下载次数：300 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 张玉伟;孟雅楠;张馨月;李梦琪;苗宇船;
目的 探究逍遥丸对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝郁脾虚证大鼠脂肪酸β氧化的调节作用。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组，每组8只。采用高糖高脂饮食+四氯化碳(CCl_4)皮下注射+饥饱失常+慢性束缚的复合因素刺激造模。建模成功后，治疗组给予逍遥丸灌胃，正常组和模型组予等量生理盐水灌胃，每日1次，连续4 w。这期间观察各组一般情况。给药结束后取材，苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝组织病理学，并进行半定量分析；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测海马体去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(HT)含量和血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β含量；微板法检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及肝组织TG含量；Western印迹、免疫组化检测肝组织中肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT)1α和酰基辅酶A氧化酶(ACOX)1蛋白表达；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝组织CPT1α和ACOX1 mRNA相对含量。结果 与模型组相比，光镜下观察治疗组肝细胞内脂滴含量明显减少；海马体NE、5-HT、HDL-C、IL-10含量、肝组织CPT1α、ACOX1 mRNA、蛋白及免疫组化阳性表达率明显升高，血清ALT、TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6、IL-1β含量、肝组织TG含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 逍遥丸治疗NASH肝郁脾虚证的作用机制可能是上调CPT1α、ACOX1转录表达，调控脂肪酸β氧化。
2024年19期 v.44 4704-4710页 [查看摘要][在线阅读][下载 1934K] [下载次数：578 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1 ] - 黎晓宇;张天华;赵莎彤;肖乐;彭艳;肖小娟;魏星;钟艳;
目的 观察电针对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠肠道菌群特定菌属含量和肠黏膜相关免疫因子的影响。方法 SD大鼠随机分为空白对照组、DGP模型组、甲氧氯普胺(胃复安)组、电针组。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)结合高脂高糖不规律饮食制备DGP模型。胃复安组以1 ml/100 g的剂量予1.7%浓度的胃复安药液灌胃；电针组取同侧“足三里”“梁门”“三阴交”电针治疗。血糖仪测量血糖、酚红灌胃测量胃排空率及小肠推进率，实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术测定致病菌肠球菌，益生菌乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌含量，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清内毒素、血清免疫球蛋白(IgA)、回肠分泌型免疫球蛋白(sIgA)含量、肠道炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平，免疫组化法检测肠黏膜T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+表达，苏木素-伊红(HE)染色法观察肠黏膜结构。结果 造模前，各组血糖值无明显差异(P>0.05)。造模后，与空白对照组相比，DGP模型组血糖值显著上升，胃排空率与小肠推进率显著降低，致病菌数量显著增多，有益菌数量显著减少，血清内毒素含量明显增加，IgA水平明显减少，炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α水平明显增多，抗炎因子IL-10含量明显减少，CD3~+、CD4~+表达明显降低，CD8~+表达明显升高(P<0.05,P<0.01),肠黏膜结构损害严重；干预后，与DGP模型组相比，电针组和胃复安组血糖值显著下降，胃排空率与小肠推进率显著升高，致病菌明显减少，有益菌显著增多，血清内毒素含量明显减少，IgA和sIgA水平明显增高，致炎因子IL-6、IL-8、TNF-α水平明显减少，抗炎因子IL-10水平明显增多，CD3~+、CD4~+细胞均显著高表达，CD8~+显著低表达(P<0.05,P<0.01),肠黏膜结构损害程度较轻；与胃复安组相比，电针组CD3~+、IL-8含量显著升高，其余指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 电针可能通过调节肠道菌群影响肠黏膜免疫从而促进胃肠动力。
2024年19期 v.44 4710-4717页 [查看摘要][在线阅读][下载 1456K] [下载次数：421 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 朱艳秋;刘春宏;钱薇;张飞;刘杰民;褚明亮;
目的 研究柴胡皂苷D对胃癌细胞糖酵解代谢及其肿瘤生物学特性的影响。方法 采用不同浓度的柴胡皂苷D(0.0,0.5,1.0,2.0μmol/L)处理胃癌细胞AGS及MGC803;CCK8实验检测药物处理后胃癌细胞的增殖活力、划痕实验检测胃癌细胞迁徙能力、Transwell实验检测胃癌细胞侵袭能力；采用乳酸试剂盒检测胃癌细胞糖酵解代谢终产物乳酸的代谢水平；通过GEPIA在线分析TCGA和GTEx数据库中原癌基因(YAP1、c-Myc)在胃癌中表达；Western印迹检测胃癌细胞YAP1、c-Myc蛋白表达。结果 柴胡皂苷D显著抑制胃癌细胞AGS及MGC803增殖、迁移及侵袭(均P<0.05);显著抑制胃癌细胞糖酵解代谢终产物乳酸的生成水平(P<0.05)。生物信息数据库统计显示，YAP1、c-Myc在胃癌组织中表达显著高于胃正常组织(均P<0.05),柴胡皂苷D显著抑制AGS及MGC803中YAP1、c-Myc蛋白表达(均P<0.05)。结论 柴胡皂苷D能够抑制胃癌细胞部分肿瘤生物学表型，其机制可能与其抑制了胃癌细胞糖酵解代谢及癌基因YAP1、c-Myc蛋白表达相关。
2024年19期 v.44 4717-4722页 [查看摘要][在线阅读][下载 1649K] [下载次数：467 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：1 ] - 闫文斌;李琦;郑泉;张永平
;何剑全;
目的 探究维生素(Vit)D联合金天格胶囊(JTG)对骨质疏松(OP)大鼠骨钙素(OPG)、血管再生及微量元素的影响。方法 将40只大鼠分为健康组、模型(OP)组、JTG+VitD组、JTG组，每组10只。JTG+VitD组采用0.96 g/kg JTG+0.2μg/kg VitD3进行灌胃处理；JTG组采用0.96 g/kg JTG灌胃处理；健康组与OP组每日给予等体积蒸馏水灌胃，均连续给药30 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测OPG、吡啶酚(PYD)及微量元素镁(Mg)、铁(Fe)、锌(Zn)、钙(Ga),使用微型计算机断层扫描(Micro-CT)检测股骨组织微血管形态，苏木素-伊红(HE)染色观察骨组织形态。结果 与健康组比较，OP组血清中PYD、Tb.Sp升高、OPG、Mg、Fe、Zn、Ga、Tb.Th、血管数量降低，差异有统计学意义(P<0.05);与OP组比较，JTG组血清中PYD、Tb.Sp降低、OPG、Mg、Fe、Zn、Ga、血管数量升高，差异有统计学意义(P<0.05);与JTG组比较，JTG+VitD组血清中PYD、Tb.Sp降低、OPG、Mg、Fe、Zn、Ga、Tb.Th、血管数量升高，差异有统计学意义(P<0.05)。健康组股骨组织结构完整；OP组骨组织损伤严重；JTG组骨小梁分布稍稀松，排列有所紧密，仍有不连续现象；JTG+VitD组骨小梁组织形态逐渐连续、饱满，排列明显致密，骨髓腔间距变窄。结论 VitD联合JTG治疗OP的机制可能与增强OPG水平、提高血管再生及增加机体微量元素含量等具有一定相关性。
2024年19期 v.44 4722-4727页 [查看摘要][在线阅读][下载 1601K] [下载次数：366 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 汪四海;方朝晖;储俊;赵进东;倪英群;鲍陶陶;牛云飞;经加吻;朱梦燕;李瑜璠;王冠超;乔磊;
目的 观察丹蛭降糖胶囊(DJC)对糖尿病心肌病(DCM)模型大鼠心肌组织金属基质蛋白酶(MMP)9及其抑制剂(TIMP)-1表达和心肌重构的影响，探讨DJC防治DCM心肌重构的作用机制。方法 100只雄性SD大鼠随机选取15只作为正常对照(NC)组，其余85只大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg联合高糖高脂饮食建立2型DCM模型，最后75只大鼠造模成功，随机分为DJC低、中、高剂量(L-、M-、H-DJC)组和二甲双胍(Met)组、模型(MC)组，L-、M-、H-DJC组按成人6 g/d等效剂量的0.5、1.0、2.0倍(270、540、1 080 mg/kg)灌胃处理；Met组给予二甲双胍按150 mg/(kg·d)剂量灌胃处理；MC组和NC组给予等容量蒸馏水灌胃处理，每组各15只。连续灌胃8 w,给药前及给药2、4、6、8周末检测空腹血糖水平；检测8周末大鼠体质量(BW)、心脏重量(HW)和左心室质量(LVM);超声心动图检测各组心功能；Masson染色观察心肌纤维化程度；免疫组化法检测各组心肌组织MMP9、TIMP-1蛋白表达。结果 与NC组比较，MC组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、TIMP-1蛋白表达显著下降，左室收缩末期内径(LVDs)、左室舒张末期内径(LVDd)、空腹血糖、HW/BW、LVM/BW、心肌组织MMP9蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与MC组比较，Met组和DJC各剂量组空腹血糖(第4～8周)、HW/BW、LVM/BW、MMP9蛋白表达明显降低，M-、H-DJC组和Met组LVEF和LVFS显著升高、LVDs、LVDd显著降低(P<0.05,P<0.01)。Masson染色结果显示，MC组心肌间质纤维化较NC组明显增多，DJC各剂量组和Met组较MC组有所减少。Sperman相关性分析显示，LVEF、LVFS与MMP9呈负相关，LVEF、LVFS与TIMP-1呈正相关(P<0.05,P<0.01);HW/BW、LVM/BW、LVDs、LVDd与MMP9呈正相关，HW/BW、LVM/BW、LVDs、LVDd与TIMP-1呈负相关(P<0.05,P<0.01)。结论 DJC可以减轻心肌纤维化程度，抑制DCM模型大鼠心肌重构，改善心功能，其治疗作用可能与降低MMP9和升高TIMP-1蛋白表达有关。
2024年19期 v.44 4727-4732页 [查看摘要][在线阅读][下载 2025K] [下载次数：453 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 张欢欢;范世东;何广帅;杜雪源;曹大明;路玫;
目的 动态观察针灸对环磷酰胺(CTX)小鼠骨髓细胞中生长停滞和DNA损伤诱导蛋白(Gadd)45a、细胞核内原癌基因(c-Myb)表达的影响，探讨针灸改善化疗所致骨髓抑制的分子生物学机制。方法 360只雄性昆明种小鼠分6批次，分别为治疗1～6 d,按体质量随机分组。模型组、针刺组、艾灸组腹腔注射CTX 100 mg/kg制备CTX模型小鼠，空白组注射同等剂量0.9%氯化钠溶液，3 d后模型复制成功。针刺组、艾灸组分别选取“大椎”“膈俞”“肾俞”“足三里”进行治疗，其余两组仅陪同抓取固定。每日镜检外周血白细胞(WBC);分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和RT-聚合酶链反应(PCR)法检测骨髓细胞中Gadd45a、c-Myb含量和mRNA表达水平。结果 与空白组比较，治疗第1～4天，模型组外周血WBC数量明显降低(P<0.05);治疗第4～6天，针刺组及艾灸组外周血WBC数量明显升高(P<0.05);治疗第1～6天，其余3组Gadd45a、c-Myb含量及mRNA明显降低(P<0.05)。与模型组比较，治疗第2～6天，针刺组及艾灸组外周血WBC数量明显升高(P<0.05);治疗第1～6天，针刺组及艾灸组Gadd45a、c-Myb含量明显升高(P<0.05);治疗第4、6天，针刺组Gadd45a mRNA明显升高(P<0.05);治疗第1、3、5、6天，艾灸组Gadd45a mRNA明显升高(P<0.05);治疗第3～6天，针刺组c-Myb mRNA明显升高(P<0.05);治疗第1～6天，艾灸组c-Myb mRNA明显升高(P<0.05)。与针刺组比较，治疗第3～6天，艾灸组c-Myb mRNA明显升高(P<0.05);治疗第1～6天，艾灸组Gadd45a含量及mRNA、c-Myb含量大多数较高，但差异无统计学意义(P>0.05),提示灸法有优于针法的趋势。结论 针灸可升高CTX小鼠外周血白细胞，上调CTX小鼠骨髓细胞中Gadd45a、c-Myb含量和mRNA表达，修复损伤的造血微环境可能是其改善骨髓抑制的微观机制之一。
2024年19期 v.44 4733-4738页 [查看摘要][在线阅读][下载 1252K] [下载次数：331 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 荆雪宁;吴君;孔晓妮;刘娟娟;王丹丹;韩芸;
目的 研究金荞麦多糖(FCP)对人胃癌细胞SGC-7901的作用及其机制。方法 选择人胃癌细胞SGC-7901,常规培养及传代，设为阳性对照环磷酰胺(CTX)组、培养基阴性对照(空白)组及FCP 60、120、240 mg/L组。采用噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖，Hoechst33258染色法观察细胞凋亡，Western印迹和实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)法检测凋亡相关因子蛋白和mRNA表达。结果 FCP可明显抑制细胞增殖，与空白组比较，CTX组及FCP 60、120、240 mg/L组细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),FCP作用24、48、72、96 h的细胞抑制浓度(IC50)分别为(199.48±6.84)、(137.14±14.32)、(123.21±4.67)、(122.88±5.78)mg/L。与空白组比较，FCP可明显促进细胞凋亡，在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态，如亮蓝色细胞核染色，细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较，抑凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01);与空白组比较，60、120、240 mg/L FCP能明显促进细胞SGC-7901中胱天蛋白酶(Caspase)-3、8、9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、FasmRNA和蛋白及细胞色素(Cyt)C蛋白表达(P<0.01)。结论 FCP对SGC-7901细胞增殖和促凋亡作用突出，可能与提高Caspase-3、8、9、Bax蛋白表达、降低Bcl-2蛋白表达有关。
2024年19期 v.44 4738-4742页 [查看摘要][在线阅读][下载 1321K] [下载次数：410 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 李建业;董金波;王继祥;贾云超;于洪涛;陈灵;王维山;方钦正;
目的 检测微小RNA(miR)-218-5p和骨硬化蛋白(SOST)在软骨下骨中的表达，分析二者在骨性关节炎(OA)发生发展可能存在的调控关系。方法 收集行膝关节置换Kellgren-Lawrence分级Ⅲ、Ⅳ型老年患者股骨内髁负重面的软骨下骨组织各15、14例，正常组(非骨性关节炎组)取自因创伤需要行膝上截肢术患者股骨内髁负重面的软骨下骨组织7例。采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western印迹、免疫组化技术检测miR-218-5p和SOST的表达。结果 OAⅢ、OAⅣ组miR-218-5p表达明显高于正常组，且OAⅣ组明显高于OAⅢ组(P<0.01);OAⅢ、OAⅣ组SOST mRNA及蛋白表达明显低于正常组，且OAⅣ组SOST mRNA明显低于OAⅢ组(P<0.01),OAⅣ、OAⅢ组SOST蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。OA组平均光密度(AOD)值明显高于OA组(P<0.01)。结论 miR-218-5p和SOST在软骨下骨中均有表达，且OA患者miR-218-5p呈高表达、SOST呈低表达，考虑两者可能存在负性调控关系。
2024年19期 v.44 4743-4745页 [查看摘要][在线阅读][下载 1202K] [下载次数：148 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 任婕;王立志;王肇鑫;李秤红;姚维范;陈秋晨;唐洪涛;魏敏杰;何苗;
目的 考察胶原酶软膏促进Ⅱ型糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的作用，探讨其与调控血管内皮生长因子(VEGF)表达、加速创面微血管新生，抑制白细胞介素(IL)-6等炎性因子的相关性。方法 选择SD大鼠50只，除空白组(10只外),其余各组高糖高脂饲料喂养4 w后，腹腔注射链脲佐菌素建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型，经手术在大鼠后肢制作2.0 cm×2.0 cm皮肤溃疡创面，自然暴露4 d后，随机分为模型组、对照药物组(水凝胶敷料，1次/d)、胶原酶软膏A组(1次/d)和B组(2次/d)。治疗期间，监测各组血糖；定时拍照并计算溃疡创面愈合率；分别在给药第3、7、14天切取部分皮肤溃疡创面组织，石蜡包埋，苏木素-伊红(HE)染色观察组织形态、Masson染色计算胶原纤维含量，免疫组化检测VEGF表达，根据血管内皮标记蛋白CD31表达，计算创面的微血管密度；通过眼眶后静脉丛采血，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测给药第3、7、14天各组血浆中炎性因子IL-6、IL-8与肿瘤坏死因子(TNF)-α等含量；免疫组化检测巨噬细胞标记蛋白CD68表达，计数创面巨噬细胞数量；检测创面炎性相关蛋白TSG-6表达。结果 治疗第3天，与其他组比较，胶原酶软膏B组糖尿病皮肤溃疡创面愈合率显著增加(P<0.05)。治疗第7天，与模型组比较，胶原酶软膏治疗组创面愈合率均显著增加(P<0.05)。与模型组比较，在各监测时间点(第3、7、14天)胶原酶软膏B组创面的胶原纤维含量显著增加，炎性因子IL-6含量显著降低；且在胶原酶软膏治疗早期(第3天)创面VEGF表达、新生微血管密度和抗炎因子TSG-6表达均显著增加(P<0.05)。结论 胶原酶软膏加速Ⅱ型糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合，与增加创面胶原纤维含量、促进微血管新生、调控炎症反应相关。
2024年19期 v.44 4746-4753页 [查看摘要][在线阅读][下载 3109K] [下载次数：775 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：2 ] - 覃伊;林飞;梁羽冰;
目的 研究右美托咪定保护大鼠海马神经元免受异丙酚神经毒性影响的机制。方法 取孕15～18 d的SD大鼠子宫内胎鼠提取海马神经元细胞，培养至16 d。免疫组化法鉴定细胞纯度；细胞计数试剂(CCK)-8法检测细胞活力。培养至8 d的细胞随机分为5组：对照组(C组),异丙酚组(P组),右美托咪定+异丙酚组(PD组),LY294002[磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂]+右美托咪定+异丙酚组(LPD组),7,8-二羟基黄酮[7,8-DHF,肌球蛋白受体激酶(TrkB)激动剂]+右美托咪定+异丙酚组(BDP组)。透射电子显微镜、流式细胞术检测细胞凋亡；采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1和MAPK3、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA水平；采用Western印迹法检测细胞外调节蛋白激酶(ERK)1,2、磷酸化(p)ERK1/2、Akt、pAkt、BDNF、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3活化剪切体(Cleaved-caspase3)等蛋白表达。结果 与C组相比，P组神经元细胞凋亡明显增加，BDNF和Akt mRNA及pERK1/2、pAkt和BDNF蛋白表达均明显降低(P<0.05);与P组相比，PD组神经元细胞凋亡明显减少，上述指标均明显升高(P<0.05);与C组、PD组相比，LDP组神经元细胞凋亡明显增加，上述指标均明显降低(P<0.05);与PD组相比，BDP组神经元细胞凋亡明显减少，上述指标均明显升高(P<0.05)。结论 右美托咪定减轻异丙酚造成原代海马神经元细胞凋亡可能是通过激活BDNF-TrKB-PI3K/Akt信号通路。
2024年19期 v.44 4754-4759页 [查看摘要][在线阅读][下载 1616K] [下载次数：425 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 彭雅琼;向辉;冯振源;陈卫刚;
目的 探讨黄芪多糖通过丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节蛋白激酶(MEK/ERK)通路调控食管癌细胞生物学行为。方法 食管癌细胞株进行体外培养，甲基噻唑基四唑(MTT)检测不同浓度(0.0、0.5、1.0、2.2、2.5、3.0 mg/ml)的黄芪多糖对食管癌EC109细胞增殖的影响，随后将其分为对照组、低浓度组和高浓度组及高浓度+PIK-Ⅲ组。使用MTT法对各组细胞的增殖活性进行检测；流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况；Transwell法检测细胞的迁移和侵袭；Western印迹检测MEK/ERK通路蛋白的表达。结果 伴随着黄芪多糖浓度的增加，黄芪多糖对食管癌EC109细胞的抑制率也随之上升，表明黄芪多糖可以通过剂量依赖的方式抑制食管癌EC109细胞的增殖。与0.0 mg/ml黄芪多糖相比，其余不同浓度黄芪多糖差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较，低、高浓度组细胞增OD值、迁移、侵袭、克隆数及MEK、ERK蛋白表达均显著降低，凋亡率显著升高(P<0.05);与低浓度组比较，高浓度组细胞增OD值、迁移、侵袭、克隆数及MEK、ERK蛋白表达均显著降低，凋亡率显著升高(P<0.05);与低、高浓度组比较，高浓度+PIK-Ⅲ组细胞增殖率、迁移、侵袭、克隆数及MEK、ERK蛋白表达均显著升高，凋亡率显著降低(P<0.05)。结论 黄芪多糖可以抑制食管癌EC109细胞的增殖、迁移等生物学活性，对食管癌细胞的凋亡具有促进作用，其过程可能与MEK/ERK通路关系密切。
2024年19期 v.44 4759-4763页 [查看摘要][在线阅读][下载 1317K] [下载次数：375 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1 ] - 张广辉;魏琴;李坤;苏利云;阮文思;
目的 分析基于Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB信号通路探究马钱子提取物对类风湿关节炎大鼠的干预效果。方法 选取50只SPF级SD大鼠，6～8周龄，对照组10只，剩余40只大鼠用于类风湿关节炎建模，将建模成功的36只大鼠进行分组，即药物对照组、模型组、研究组各12只。研究组给予10 ml/kg马钱子药液，药物对照组给予10 ml/kg甲氨蝶呤药液，空白组、模型组给予生理盐水10 ml/kg。检测对比各组病理组织、足部肿胀度、氧化应激指标、炎性因子、体质量、关节炎指数、胸腺指数、脾脏指数、滑膜细胞凋亡率、TLR4、NF-κB、髓样分化因子(MyD)88、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果 与对照组相比，模型组、药物对照组造模1、3、5 w大鼠足部肿胀度水平、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、体质量、关节炎指数、胸腺指数、脾脏指数、TLR4、NF-κB、MyD88、Bcl-2、NF-κB p65表达量明显升高，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)-Px、24、48、72 h滑膜细胞凋亡率、Bax表达量降低(P<0.05),研究组SOD、GSH-Px、体质量、关节炎指数、胸腺指数、脾脏指数、TLR4、NF-κB、MyD88、Bcl-2、NF-κB p65表达量略高，造模1、3、5 w大鼠足部肿胀度、MDA、TNF-α、IL-1、24、48、72 h滑膜细胞凋亡率、Bax表达量略低，但差异无统计学意义(P>0.05);与模型组、药物对照组相比，研究组SOD、GSH-Px、24、48、72 h滑膜细胞凋亡率水平、Bax表达明显上升，造模1、3、5 w大鼠足部肿胀度、体质量、关节炎指数、胸腺指数、脾脏指数、MDA、TNF-α、IL-1、TLR4、NF-κB、MyD88、Bcl-2、NF-κB p65表达量明显降低(P<0.05)。结论 马钱子提取物可减轻大鼠足部肿胀度，降低炎性因子，促进滑膜细胞凋亡，其作用机制可能与TLR4、NF-κB、MyD88,Bcl-2、Bax、NF-κB p65表达受到调节有关。
2024年19期 v.44 4763-4767页 [查看摘要][在线阅读][下载 1377K] [下载次数：841 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 李征;蔡颖娴;谭志超;
目的 探讨三七总皂苷对小鼠巨大肩袖损伤后肌肉退变的影响。方法 取80只C57BL/6J小鼠随机分成对照组、模型组、三七总皂苷低、高剂量组，每组20只，其中肌肉力量测试使用10只、步态和形态学分析使用10只。对照组切开小鼠右肩皮肤后缝合；模型组左侧为健侧、行右侧肩关节手术造模；三七总皂苷低、高剂量组在造模后腹腔注射三七皂苷30、60 mg/kg, 1次/d,连续6 w。末次注射完成后次日评估小鼠的爪印面积、步长，之后取出造模侧和健侧的冈上肌，称量并计算湿肌质量减少率，将肌肉组织快速冷冻切片，油红O染色观察脂肪情况，Masson染色评估肌纤维和胶原纤维的损伤情况。取各组另外10只小鼠，评估冈上肌肉收缩力。结果 各组爪印面积、步长比较差异均有统计学意义(P<0.05);其中模型组爪印面积、步长明显低于对照组，三七总皂苷低、高剂量组爪印面积、步长明显高于模型组，三七总皂苷高剂量组爪印面积、步长明显高于三七总皂苷低剂量组(均P<0.05)。各组湿肌质量减少率、肌纤维横截面积、冈上肌肌肉收缩力、肌脂肪浸润面积占比、胶原纤维面积占比比较差异均有统计学意义(P<0.05);其中模型组湿肌质量减少率、肌脂肪浸润面积占比、胶原纤维面积占比明显高于对照组，肌纤维横截面积、冈上肌肌肉收缩力显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);七总皂苷低、高剂量组湿肌质量减少率、肌脂肪浸润面积占比、胶原纤维面积占比明显低于模型组，肌纤维横截面积、冈上肌肌肉收缩力明显高于模型组(P<0.05,P<0.01);其中三七总皂苷高剂量组改善效果显著高于七总皂苷低剂量组(P<0.01)。结论 三七总皂苷能够有效减轻小鼠巨大肩袖损伤后肩袖肌萎缩、肌肉脂肪浸润和纤维化，改善肌肉收缩力。
2024年19期 v.44 4768-4770页 [查看摘要][在线阅读][下载 1161K] [下载次数：370 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 郭宗晓;洪小丽;郭宗锋;王祥;
目的 探究miR-143-凋亡调控因子(PUMA)信号通路在乌司他丁减轻老年大鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用。方法 健康清洁级雄性SD大鼠300只，采用随机数字表法分为对照(C)组、手术(O)组、手术+生理盐水(N)组、手术+乌司他丁(U)组和手术+乌司他丁+miR-143激动剂(J)组。C组不作任何处理，O组在2%异氟烷吸入麻醉下行胫骨骨折开放复位内固定术，U组在胫骨骨折开放复位内固定术前5 min给予10 000 U/kg尾静脉注射乌司他丁；N组在胫骨骨折开放复位内固定术前5 min给予同等剂量的盐水其余同U组；J组于术前经大鼠尾静脉注射miR-143激动剂(25 mg/kg)其余同U组。采用Morris水迷宫法记录大鼠逃避潜伏期和游泳路径，采用旷场实验记录大鼠直立次数和中央格停留时间，采用电镜观察海马血脑屏障微结构，测定脑组织伊文思蓝(EB)含量，采用Western印迹检测海马PUMA、紧密连接蛋白(claudin)-5、闭合蛋白(occludin)、闭合连接蛋白(ZO)-1蛋白含量，采用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测海马miR-143和PUMA mRNA表达。结果 与C组比较，O、N、U和J组术后逃避潜伏期、游泳路径、中央格停留时间延长，直立次数减少，脑组织EB含量增加，海马PUMA、claudin-5、occludin和ZO-1的表达下调，miR-143表达上调和PUMA mRNA表达下调，差异显著(P<0.05);与O组相比较，U组和J组术后逃避潜伏期、游泳路径、中央格停留时间缩短，直立次数增多，脑组织EB含量减少，海马PUMA、claudin-5、occludin和ZO-1的表达上调，miR-143的表达下调和PUMA mRNA的表达上调，差异显著(P<0.05);与U组相比较，J组术后逃避潜伏期、游泳路径、中央格停留时间延长，直立次数减少，脑组织EB含量增加，海马PUMA、claudin-5、occludin和ZO-1的表达下调，miR-143的表达上调和PUMA mRNA的表达下调，差异显著(P<0.05)。与术前相比，O、N、U和J组术后各时间点逃避潜伏期、游泳路径、中央格停留时间延长，直立次数减少，脑组织EB含量增加，海马PUMA、claudin-5、occludin和ZO-1的表达下调，miR-143的表达上调和PUMA mRNA的表达下调，差异显著(P<0.05)。结论 乌司他丁可改善老龄大鼠术后认知功能，其机制可能与miR-143的表达下调导致靶基因PUMA的表达上调，从而调控血脑屏障claudin-5的表达上调有关。
2024年19期 v.44 4771-4776页 [查看摘要][在线阅读][下载 1441K] [下载次数：187 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 邱友燕;曾炼坤;熊静妮;蒋婵;李素燕;刘雪芳;陈丹丹;
目的 探究利拉鲁肽通过蛋白激酶A-碳水化合物反应元件结合蛋白(PKA-ChREBP)途径减少代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)细胞模型的脂质沉积。方法 采用不同浓度油酸处理人肝癌细胞HepG2构建MAFLD模型，油红O染色观察细胞脂质堆积情况，将细胞分为对照组、模型组、模型+si-NC组、模型+si-GLP-1R组、模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组，采用油酸处理建模，模型+si-NC组、模型+si-GLP-1R组、模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组。用胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)激动剂利拉鲁肽(10 nmol/L)处理MAFLD模型细胞3、6、12、24 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测细胞中GLP-1R表达。分别用GLP-1R敲低质粒(si-GLP-1R)、利拉鲁肽处理MAFLD模型细胞，分别采用实时荧光定量PCR、Western印迹法、ELISA和分光光度法检测PKA、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、环磷酸腺苷(cAMP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)和三酰甘油(TG)表达。分别用利拉鲁肽、PKA抑制剂、AMPK抑制剂处理MAFLD模型细胞，通过免疫荧光法和Western印迹法检测ChREBP表达。结果 与模型组比较，模型+si-GLP-1R组脂质沉积增多，TG含量、ChREBP、ACC、FAS、GPAT mRNA表达升高，GLP-1R mRNA、p-ChREBP蛋白、PKA mRNA及蛋白、cAMP、p-PKA蛋白表达降低，差异显著(P<0.05);与模型+si-GLP-1R组比较，模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组脂质沉积减少，TG含量、ChREBP、ACC、FAS、GPAT mRNA表达降低，GLP-1R mRNA、p-ChREBP蛋白、PKA mRNA及蛋白、cAMP、p-PKA蛋白表达升高，差异显著(P<0.05)。但各组AMPK mRNA及蛋白、p-AMPK蛋白表达的比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较，模型+利拉鲁肽组胞质/核内ChREBP荧光密度及p-ChREBP表达升高，差异显著(P<0.05);与模型+利拉鲁肽组比较，模型+利拉鲁肽+PKA抑制剂组、模型+利拉鲁肽+AMPK抑制剂组胞质/核内ChREBP荧光密度及p-ChREBP表达降低，差异显著(P<0.05)。结论 利拉鲁肽可能通过激活PKA信号通路，减少胞内ChREBP表达，改善MAFLD细胞模型的脂质沉积。
2024年19期 v.44 4777-4782页 [查看摘要][在线阅读][下载 1738K] [下载次数：270 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 周立涛;陶善东;史文婷;邓媛;王春玲;朱家斌;
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01116对微小RNA(miR)-650的调控作用及其对急性淋巴白血病细胞增殖、凋亡的影响。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测急性淋巴白血病细胞中LINC01116与miR-650的表达水平；甲基噻唑基四唑(MTT)法检测干扰LINC01116的表达及miR-650过表达对急性淋巴白血病细胞增殖的影响；流式细胞术检测干扰LINC01116表达及miR-650过表达对急性淋巴白血病细胞凋亡的影响；双荧光素酶报告实验检测LINC01116与miR-650的调控作用；Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、 B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3蛋白表达。结果 LINC01116在急性淋巴白血病细胞系(MOLT-4、CEM-C1、CCRF-CEM)中的表达水平显著高于正常骨髓基质细胞(P<0.05),而miR-650表达水平显著低于正常骨髓基质细胞(P<0.05),其中LINC01116在MOLT-4细胞中的表达水平相对较高，用于后续实验。干扰LINC01116的表达及miR-650过表达后，MOLT-4细胞活力显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著增加(P<0.05),Bax、酶切Caspase3、p21、p27表达显著上调(P<0.05),CyclinD1、Bcl-2表达显著下调(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC01116可靶向结合miR-650并调控其表达及活性；抑制miR-650的表达可逆转干扰LINC01116的表达对MOLT-4细胞增殖、凋亡的作用。结论 LINC01116可通过下调miR-650的表达促进急性淋巴白血病细胞增殖，抑制细胞凋亡。
2024年19期 v.44 4783-4787页 [查看摘要][在线阅读][下载 1355K] [下载次数：150 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 张慧仪;董志军;崔秀成;
目的 探讨菩人丹(PRD)对糖尿病大鼠视网膜组织中S100A8、S100A9表达的影响。方法 采用高脂高糖饮食喂养大鼠，低剂量的链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型，采用随机数字法将造模成功的大鼠分为模型组和PRD组，每组12只，另取同周龄大鼠12只为对照组，成模后的PRD组灌胃PRD水煎液，剂量为1.8 g/(kg·d),连续8 w,另外两组予等体积蒸馏水灌胃；分别采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)和免疫组织化学染色观察视网膜组织中S100A8、S100A9 mRNA和蛋白的相对表达量，采用苏木素-伊红(HE)染色法观察视网膜形态结构。结果 模型组视网膜中S100A8、S100A9 mRNA和蛋白表达量明显高于对照组(P<0.05),PRD组S100A8、S100A9 mRNA和蛋白相对表达水平明显低于模型组(P<0.05)。结论 PRD可能是通过降低S100A8、S100A9表达，来减轻糖尿病视网膜的微炎症损伤。
2024年19期 v.44 4788-4791页 [查看摘要][在线阅读][下载 1537K] [下载次数：148 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 郑巧;陈越;李培莉;
目的 探讨香叶木素(Dio)通过调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/核因子(NF)-κB信号通路对梗阻性肾病(ON)大鼠肾损伤的影响。方法 随机选择15只大鼠为假手术(S)组，通过单侧输尿管结扎(UUO)造模，将造模成功的大鼠随机平分为模型(M)组、低剂量Dio(L-Dio, 0.25 mg/kg Dio)组、中剂量Dio(M-Dio, 0.50 mg/kg Dio)组、高剂量Dio(H-Dio, 1.00 mg/kg Dio)组、高剂量Doi+PI3K/AKT/NF-κB通路激活剂740 Y-P(H-Dio+740 Y-P,1.00 mg/kg Dio+10 mg/kg 740 Y-P)组各15只。酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测氧化应激及肾功能相关指标；苏木素-伊红(HE)及Masson染色观察肾组织病理学情况；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肾组织炎症因子水平；TUNEL染色评估细胞凋亡情况；免疫组化检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、淋巴细胞抗原(Ly)6g、细胞增殖核抗原(Ki)-67水平；Western印迹检测各组肾组织PI3K、AKT、NF-κB蛋白表达。结果 S组肾小管上皮细胞排列整齐，肾间质未见炎性细胞浸润现象，仅有微量胶原成分表达，M组肾间质出现大量炎性细胞浸润现象，肾小管扩张，上皮细胞出现空泡、坏死现象，且排列杂乱，肾小管上皮细胞凋亡数量、 collagenⅠ、Ly6g、Ki-67阳性细胞数、胶原容积分数、丙二醛(MDA)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达显著增加(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平显著下降(P<0.05);与M组相比，L-Dio组、M-Dio组、H-Dio组改善了肾组织炎性细胞浸润、肾小管扩张及上皮细胞坏死、脱落现象，肾小管上皮细胞凋亡数量、 collagenⅠ、Ly6g、Ki-67阳性细胞数、胶原容积分数、MDA、BUN、Scr、MCP-1、TNF-α、IL-1β水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达显著降低(P<0.05),SOD水平显著升高(P<0.05),且随着Dio添加剂量的增加，作用效果越好；H-Dio+740 Y-P组与M组效果相似，740 Y-P消除了Dio对ON大鼠肾损伤的改善作用。结论 Dio可能通过下调PI3K/AKT/NF-κB信号通路减轻ON大鼠的肾损伤。
2024年19期 v.44 4792-4797页 [查看摘要][在线阅读][下载 2292K] [下载次数：592 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：2 ] - 叶记林;吴爱莲;彭建明;刘延庆;汤劲松;
目的 研究β-羟基异戊酰紫草素(HIVS)对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响及其与Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路的关系。方法 将人结肠癌HT-29细胞分为Control组和β-HIVS组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况；琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术判断细胞凋亡；利用荧光素酶报告实验分析β-HIVS对Wnt/β-catenin信号通路的影响；Western印迹法检测凋亡相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达情况；实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测β-catenin和下游靶基因骨髓细胞瘤病毒癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1的转录水平。检测Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl对β-HIVS引起HT-29细胞增殖抑制、凋亡率、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2表达下降和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达升高的影响。结果 与对照组比较，β-HIVS对HT-29细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05),并诱导HT-29细胞凋亡。β-HIVS作用能明显下调Bcl-2表达，明显提高Bax表达(P<0.05);β-HIVS作用可显著抑制HT-29细胞Wnt/β-catenin信号通路，下调β-catenin、c-Myc和CyclinD1蛋白表达和转录活性(P<0.05)。与β-HIVS组比较，β-HIVS+LiCl组HT-29细胞增殖率明显升高，凋亡率显著降低，Bcl-2表达明显升高，Bax表达明显降低(P<0.05)。结论 β-HIVS能够在体外抑制人结肠癌HT-29细胞增殖，诱导HT-29细胞凋亡，其作用机制可能与β-HIVS抑制Wnt/β-catenin信号通路，下调Bcl-2表达，上调Bax表达密切相关。
2024年19期 v.44 4797-4801页 [查看摘要][在线阅读][下载 1411K] [下载次数：264 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 陈书煌;杜伟;邓静嫔;吴剑;
目的 基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探讨小檗碱对体外膀胱癌细胞T24的增殖、侵袭、凋亡及细胞周期的影响及作用机制。方法 以体外膀胱癌细胞T24为研究对象，分别设置空白对照(0μmol/L)组、小檗碱低、中、高剂量组(25、50、75μmol/L)及阳性对照组(氟尿嘧啶80μg/ml)。CCK-8法检测小檗碱对体外膀胱癌细胞T24增殖的影响；Transwell实验检测小檗碱对体外膀胱癌细胞T24侵袭的影响；流式细胞术检测小檗碱对体外膀胱癌细胞T24凋亡及细胞周期的影响；Western印迹法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果 小檗碱低、中、高剂量组膀胱癌细胞T24细胞增殖活力、细胞侵袭数较空白对照组显著降低，细胞凋亡率较空白对照组显著增加，呈剂量依赖性(P<0.05);小檗碱高剂量组与阳性对照组膀胱癌细胞T24细胞增殖活力、细胞侵袭数、细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。小檗碱低、中、高剂量组膀胱癌细胞T24 G2-M期较空白对照组显著增加，呈剂量依赖性(P<0.05);小檗碱高剂量组与阳性对照组膀胱癌细胞G2-M期差异无统计学意义(P>0.05);空白对照组、小檗碱低、中、高剂量组、阳性对照组膀胱癌细胞T24 G0-G1期、S期差异无统计学意义(P>0.05)。小檗碱低、中、高剂量组激活型半胱氨酸蛋白酶(cleaved Caspase)-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平较空白对照组增加，Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达水平较空白对照组显著下降，呈剂量依赖性(P<0.05);小檗碱高剂量组与阳性对照组cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 小檗碱可以通过抑制PI3K/AKT信号通路降低膀胱癌细胞增殖活力及侵袭数，诱导膀胱癌细胞凋亡及周期阻滞。
2024年19期 v.44 4802-4806页 [查看摘要][在线阅读][下载 1555K] [下载次数：599 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 高金勇;翟宇;梁慧;
目的 探讨远志皂苷(Tenuigenin)通过核转录因子(NF)-κB通路对缺氧缺糖(OGD)诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响。方法 分离培养大鼠皮质神经细胞，通过OGD诱导建立大鼠皮质神经细胞损伤模型，将细胞分为对照(Control组)、模型(OGD组，缺氧缺糖处理)、Tenuigenin低剂量(Tenuigenin-L组，OGD诱导后用50μmol/L Tenuigenin处理)、Tenuigenin高剂量(Tenuigenin-H组，OGD诱导后用200μmol/L Tenuigenin处理)、Tenuigenin+抑制剂(Tenuigenin+PDTC组，OGD诱导后用200μmol/L Tenuigenin和100μmol/L NF-κB抑制剂PDTC)。用CCK-8检测细胞活性；流式细胞术检测细胞凋亡；Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved胱天蛋白酶(caspase)-3、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达。结果 与Control组相比，OGD组细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显降低，细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、p-NF-κB p65蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α明显增加(P<0.05)。与OGD组相比，Tenuigenin-L组、Tenuigenin-H组细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显增加，细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、p-NF-κB p65蛋白表达、IL-1β、IL-10、TNF-α明显降低(P<0.05)。与Tenuigenin组相比，Tenuigenin+PDTC组细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显增加，细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3、IL-1β、IL-10、TNF-α明显降低(P<0.05)。结论 Tenuigenin通过抑制NF-κB通路减轻OGD诱导的大鼠皮质神经细胞凋亡和炎性损伤。
2024年19期 v.44 4806-4810页 [查看摘要][在线阅读][下载 1422K] [下载次数：357 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1 ] - 郭云辉;张楠楠;刘鑫;姜广坤;王璐;刘明;
目的 探讨曲古抑菌素(TS)A通过靶向组蛋白去乙酰化酶(HDAC)4改善老龄自发性高血压(SHR)大鼠心肌缺血模型的作用机制。方法 将SHR大鼠随机分为假手术组、模型组、TSA组和TSA+HDAC4组，每组10只，正常WKY大鼠10只为空白组。除空白组和假手术组外，采用冠状动脉结扎法建立老龄SHR大鼠心肌缺血模型，TSA组于造模前腹腔注射TSA,TSA+HDAC4组腹腔注射TSA+尾静脉注射慢病毒进行HDAC4过表达。采用超声心动图测定各组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)、射血分数(EF)、左室舒张末压(LVEDP)、每搏输出量(SV)、左心室质量指数(LVMI)及舒张期和收缩期左室后壁厚度(LVPWTd、LVPWTs);脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测大鼠心肌细胞凋亡率；免疫组化法检测心肌组织B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、自噬相关蛋白(Atg)5和Atg7表达；免疫荧光法检测心肌组织活性氧(ROS)表达；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平；实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测心肌组织HDAC4、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、心房钠尿肽(ANP)和Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体(AT1-R)基因表达；Western印迹检测心肌组织HDAC4蛋白表达。结果 与模型组相比，TSA组LVFS、EF、SV明显升高，LVEDP明显降低(P<0.05)。与模型组相比，TSA组心肌组织中HDAC4、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA和ROS水平显著降低，SOD和GSH-PX水平显著升高(P<0.05);与TSA组比较，TSA+HDAC4组TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA和ROS水平显著升高，SOD和GSH-PX水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比，TSA组LVPWT、LVMI、血压值及ANP和AT1-R水平显著降低(P<0.05);与TSA组比较，TSA+HDAC4组上述指标则显著升高(P<0.05)。与模型组相比，TSA组心肌组织中Bax、Atg5、Atg7表达水平及心肌细胞凋亡率显著降低，Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05);与TSA组比较，TSA+HDAC4组Bax、Atg5、Atg7表达水平及心肌细胞凋亡率则显著升高，Bcl-2表达水平显著降低(均P<0.05)。结论 TSA能够有效改善老龄SHR大鼠心肌缺血模型的心肌组织形态和心功能指标，其作用机制可能与抑制HDAC4表达从而缓解心肌组织炎症反应和氧化应激、减轻心肌肥厚、抑制心肌细胞凋亡和自噬有关。
2024年19期 v.44 4810-4815页 [查看摘要][在线阅读][下载 2467K] [下载次数：314 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 曲福楠;孙传锋;段闪闪;汤玉龙;王世霞;张雷;
目的 探究神经生长因子(NGF)联合牙髓干细胞(DPSCs)对糖尿病牙种植大鼠骨小梁及血管生成的影响。方法 选取50只SPF级SD雄性大鼠，随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、NGF(NG)组、DPSCs(DP)组、联合(UI)组各10只，NO组不建模，MO组、NG组、DP组、UI组进行糖尿病牙种植建模，建模成功后，NG组种植体周围注射2 U/kg的NGF,DP组种植体周围注射1 ml 1×10~9/ml的DPSCs, UI组给予NGF联合DPSCs治疗，NO组、MO组同期同位置注射同体积生理盐水，血糖仪检测空腹血糖(FBG),苏木素-伊红(HE)染色法检测种植体周围骨组织病理形态，显微镜观察骨小梁等骨形态学指标，Western印迹检测血管生成相关蛋白表达。结果 与NO组相比，MO组FBG水平显著升高(P<0.05);与MO组相比，NG组、DP组、UI组FBG水平显著降低(P<0.05);NG组、DP组对比无明显差异(P>0.05);UI组比DP组降低显著(P<0.05)。NO组上颌组织结构正常，骨小梁致密，骨基质排列紧凑，可见少量纤维组织，MO组骨组织明显减少，骨小梁稀疏，纤维骨痂排列散乱，可见大量纤维组织及少量新骨形成，可见少量血管生成。与MO组比较，NG组、DP组、UI组病理结构明显改善，新骨形成明显增多，可见大量骨小梁及血管分布其中；与NO组相比，MO组结合骨板宽度、种植区成骨细胞数量、种植区骨细胞数量、非种植区骨细胞数量显著降低(P<0.05);与MO组相比，NG组、DP组、UI组结合骨板宽度、种植区成骨细胞数量、种植区骨细胞数量、非种植区骨细胞数量显著升高(P<0.05);NG组、DP组对比无明显差异(P>0.05);UI组比DP组升高显著(P<0.05)。与NO组相比，MO组骨小梁体积、骨小梁厚度、骨小梁密度显著降低，骨小梁间隙显著升高(P<0.05);与MO组相比，NG组、DP组、UI组骨小梁体积、骨小梁厚度、骨小梁密度显著升高，骨小梁间隙显著降低(P<0.05);NG组、DP组对比无明显差异(P>0.05);UI组比DP组变化显著(P<0.05)。与NO组相比，MO组上颌组织血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体(VEGFR)蛋白表达显著降低(P<0.05);与MO组相比，NG组、DP组、UI组上颌组织VEGF、VEGFR蛋白表达显著升高(P<0.05);NG组、DP组对比无明显差异(P>0.05);UI组比DP组升高显著(P<0.05)。结论 NGF联合DPSCs对糖尿病牙种植大鼠具有明显作用，可显著改善骨小梁形态，并促进新生血管生成。
2024年19期 v.44 4816-4820页 [查看摘要][在线阅读][下载 1444K] [下载次数：162 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 申丽华;王东姣;李占霞;高向明;
目的 分析基于蛋白酪氨酸激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路探究下调微小RNA-622(miR-622)对卵巢癌大鼠的干预效果。方法 选取50只雌性SPF级Wistar大鼠，10只大鼠作为对照组，另外40只建立卵巢癌模型，将建模成功30只大鼠分为模型组、模拟物组、抑制剂各10只，对照组、模型组注射同剂量生理盐水，模拟物组注射miR-622p mimic,抑制剂组腹腔注射miR-622 inhibitor。结果 与对照组相比，另外3组miR-622表达量、荷瘤重量平均值、腹水量平均值、肿瘤体积、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、癌胚抗原(CEA)、人附睾蛋白(HE)4、糖类抗原(CA)153、JAK2、STAT3表达量升高，IL-2表达水平降低，差异显著(P<0.05);与模型组相比，模拟物组miR-622表达量、荷瘤重量平均值、腹水量平均值、肿瘤体积、IL-2、IL-6、TNF-α、CEA、HE4、CA153、JAK2、STAT3表达量升高，IL-2表达水平降低，抑制剂组miR-622表达量、荷瘤重量平均值、腹水量平均值、肿瘤体积、IL-2、IL-6、TNF-α、CEA、HE4、CA153、JAK2、STAT3表达量降低，IL-2表达水平升高，差异显著(P<0.05)。结论 下调miR-622表达可降低卵巢癌大鼠肿瘤体积、炎症因子、CEA、HE4、CA153表达水平，其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。
2024年19期 v.44 4820-4824页 [查看摘要][在线阅读][下载 1296K] [下载次数：250 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 王科;路琪;陆锡平;
目的 探讨胡黄连苷(Pic)Ⅱ调节Janus蛋白酪氨酸激酶(JAK)2/转录激活因子(STAT)3信号通路对骨质疏松(OP)大鼠骨代谢和骨密度(BMD)的影响。方法 68只大鼠随机分为假手术组及造模组，造模组通过切除双侧卵巢建立OP大鼠模型，随后将造模成功的OP大鼠分为OP组、PicⅡ低剂量(PicⅡ-L)组(2.5 mg/kg PicⅡ)、PicⅡ高剂量(PicⅡ-H)组(10 mg/kg PicⅡ)、阳性对照组(1.02 g/kg阿仑膦酸钠)、PicⅡ-H+JAK2/STAT3通路抑制剂(PicⅡ-H+AG490)组(10 mg/kg PicⅡ+1 mg/kg AG490)。干预结束后，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中雌二醇(E2)及骨钙素(OC)含量；全自动生化仪检测尿液中磷(P)、钙(Ca)、肌酐(Cre)及血清中碱性磷酸酶(ALP)含量；X射线检测BMD含量；苏木素-伊红(HE)检测股骨组织形态学变化；Western印迹检测JAK2/STAT3通路相关蛋白表达。结果 与假手术组相比，OP组骨小梁排列稀松，新生血管较少，E2及BMD水平显著降低，ALP、OC含量、Ca/Cre、P/Cre及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著增加(P<0.05);与OP组相比，PicⅡ-L组、PicⅡ-H组骨组织形态学得到改善，E2及BMD水平显著增加，ALP、OC含量、Ca/Cre、P/Cre及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05);与PicⅡ-H组相比，PicⅡ-H+AG490组骨小梁生长较好，E2及BMD水平显著增加，ALP、OC含量、Ca/Cre、P/Cre及p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),PicⅡ-H+AG490组各指标变化与阳性对照组无统计学差异(P>0.05)。结论 PicⅡ通过抑制JAK2/STAT3信号通路发挥对OP大鼠的骨保护作用。
2024年19期 v.44 4824-4828页 [查看摘要][在线阅读][下载 1492K] [下载次数：382 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 许慧;李正姐;姚云;胡晨晨;潘云;鲁亚平;
目的 探讨白藜芦醇对绝经期抑郁模型小鼠行为的影响和可能机制。方法 慢性约束应激B6.Cg-TgN(Thy-YFP-H)-2Jrs(20～25 g)成年雌性去卵巢转基因小鼠构建绝经期抑郁模型。假手术组为对照，去卵巢小鼠随机分为模型组、氯丙咪嗪组、白藜芦醇组，每组10只。采用蔗糖偏好实验、新奇抑制摄食实验、悬尾实验、强迫游泳实验评估小鼠抑郁样行为；ImageJ图像分析法测量海马树突密度；实时荧光定量-聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹检测小鼠海马组织Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物(RAC)1和细胞分裂周期(CDC)42表达水平。结果 与假手术组比较，模型组蔗糖偏好率、海马CA1、CA3、DG区树突密度、CD42 mRNA及蛋白表达水平显著下降，摄食潜伏期、水中漂浮不动时间明显延长(P<0.05);与模型组比较，白藜芦醇组蔗糖偏好率、海马各区树突密度，RAC1蛋白表达水平及CDC42 mRNA和蛋白表达水平明显升高，摄食潜伏期、不动时间显著偏短(P<0.05)。结论 白藜芦醇可能通过促进海马RAC1和CDC42的表达，增加树突密度，进而改善绝经期抑郁小鼠抑郁样行为。
2024年19期 v.44 4828-4832页 [查看摘要][在线阅读][下载 1243K] [下载次数：375 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1 ] - 方芳;汪宏;刘鲲;
目的 探究安石榴苷通过蛋白激酶B(Akt)/叉头框蛋白(Fox)O3a信号通路上调自噬对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),分别用5、10、20μmol/L安石榴苷、20μmol/L安石榴苷+10μmol/L Akt激活剂(SC79)预处理2 h,然后与10μg/ml LPS共孵育或10μg/ml LPS单独孵育24 h,对应实验分组分别为低、中、高剂量-安石榴苷(L、M、H-安石榴苷)组、H-安石榴苷+SC79组、LPS组，另设置正常培养的对照(Control)组，CCK-8法检测各组HK-2细胞活力；流式细胞术检测各组HK-2细胞凋亡；透射电镜观察各组HK-2细胞自噬小体数量；免疫荧光检测各组HK-2细胞自噬相关蛋白阳性表达；Western印迹法检测各组HK-2细胞凋亡及Akt/FoxO3a信号通路相关蛋白表达。结果 与Control组相比，LPS组HK-2细胞活力下降，凋亡率及B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)/Bcl-2蛋白表达增加，自噬小体数量及微管相关蛋白1轻链(LC)3-Ⅱ、自噬相关蛋白(Beclin)-1阳性表达减少，p-Akt、p-FoxO3a蛋白表达增加，差异显著(P<0.05);L、M、H-安石榴苷可明显改善上述情况，且呈明显剂量依赖性(P<0.05);而在H-安石榴苷的基础上增加SC79干预，HK-2细胞活力下降，凋亡现象加重，自噬被抑制，差异显著(P<0.05)。结论 安石榴苷能够减轻LPS诱导的HK-2细胞凋亡，可能通过抑制Akt/FoxO3a信号通路而上调自噬实现。
2024年19期 v.44 4832-4836页 [查看摘要][在线阅读][下载 1654K] [下载次数：375 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1 ] - 孙景召;王勇刚;
目的 分析沙棘籽油调节NOD样受体蛋白(NLRP)3炎性小体对力竭运动大鼠肾组织炎症损伤的影响。方法 选取40只SPF级SD大鼠，10只作为对照组，另外30只建立力竭运动模型，共有23只建模成功，分为模型组9只，低剂量组、高剂量组各7只。观察各组病理组织学、肾损伤生物标志物、心肌损伤生物标志物、炎症因子水平、氧化应激指标、肾组织NLRP3炎性小体蛋白表达量。结果 与对照组相比，模型组、低剂量组、高剂量组肾损伤分子(KIM)-1、尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGEL)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、丙二醛(MDA)水平、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1表达量显著升高，IL-10、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平显著降低(P<0.05);与模型组相比，低、高剂量组KIM-1、NGEL、Scr、BUN、CK、CK-MB、LDH、AST、IL-6、IL-1β、TNF-ɑ、MDA水平、NLRP3、ASC、酶切caspase-1表达量显著降低，IL-10、SOD、CAT、GSH-PX水平显著升高(P<0.05);与低剂量组相比，高剂量组KIM-1、NGEL、Scr、BUN、CK、CK-MB、LDH、AST、IL-6、IL-1β、TNF-ɑ、MDA水平、NLRP3、ASC、酶切caspase-1表达量显著降低，IL-10、SOD、CAT、GSH-PX水平显著升高(P<0.05)。结论 采用沙棘籽油干预力竭运动大鼠，可抑制NLRP3炎性小体表达，减轻大鼠肾组织炎症损伤，发挥抗氧化能力。
2024年19期 v.44 4837-4840页 [查看摘要][在线阅读][下载 1189K] [下载次数：263 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ]